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生物葉綠體色素的提取和分離知識點
1、原理:
(1)葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑無水乙醇(或丙酮)中,所以用無水乙醇可提取葉綠體中的色素。
(2)不同的色素在層析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子隨層析液在濾紙條上擴散得快,溶解度低的色素分子隨層析液在濾紙條上擴散得慢,因而可用層析液將不同色素分離。
2、結(jié)果分析:
(1)從色素帶的寬度可知色素含量的多少依次為:葉綠素a>葉綠素b>葉黃素>胡蘿卜素;
(2)從色素帶的位置可知色素在層析夜中溶解度大小依次是:胡蘿卜素>葉黃素>葉綠素a>葉綠素b;
(3)在濾紙上距離最近的兩條色素帶是葉綠素a 與葉綠素b ,距離最遠(yuǎn)的兩條色素帶是胡蘿卜素與葉黃素。
3、注意事項:
(1)裁取定性濾紙時,注意雙手盡量不要接觸紙面,以免手上的油脂或其他臟物污染濾紙。
(2)根據(jù)燒杯的高度制備濾紙條,讓濾紙條長度高出燒杯1cm ,高出的部分做直角彎折。
(3)畫濾液細(xì)線時,用力要均勻,速度要適中。
(4)研磨要迅速、充分。
a.因為丙酮容易揮發(fā);
b.為了使葉綠體完全破裂.從而能提取較多的色素;
c.葉綠素極不穩(wěn)定,能被活細(xì)胞中的葉綠素酶水解而被破壞。
(5)制備濾紙條時,要將濾紙條的一端剪去兩角,這樣可以使色素在濾紙條上擴散均勻,便于觀察實驗結(jié)果。
4、實驗創(chuàng)新:
在本實驗中在圓形濾紙中央點上葉綠體色素的提取液進(jìn)行層析,會得到近似同心的四個色素環(huán),由內(nèi)到外依次是黃綠色、藍(lán)綠色、黃色、橙黃色。
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