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DNA是一種長(zhǎng)鏈聚合物,組成單位為四種脫氧核苷酸,即:腺嘌呤脫氧核苷酸、胸腺嘧啶脫氧核苷酸、胞嘧啶脫氧核苷酸、鳥嘌呤脫氧核苷酸。
高考生物必備知識(shí)點(diǎn):DNA提取與鑒定實(shí)驗(yàn)原理
1、DNA在NaCl溶液中的溶解度,是隨著NaCl的濃度的變化而改變的。當(dāng)NaCl的物質(zhì)的量濃度為0.14mOl/L時(shí),DNA的溶解度最低。利用這一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2、DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。
3、DNA遇二苯胺(沸水?。?huì)染成藍(lán)色,因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。
高考生物必備知識(shí)點(diǎn):DNA提取與鑒定注意事項(xiàng)
1、步驟3析出含DNA的黏稠物中,蒸餾水要沿?zé)瓋?nèi)壁緩緩加入,不能一次快速倒入。
2、實(shí)驗(yàn)中有多個(gè)步驟都要用玻璃棒進(jìn)行攪拌,但是在不同的步驟中玻璃棒的用法不同。
實(shí)驗(yàn)用具
雞血細(xì)胞液(5~10mL);體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精,蒸餾水,質(zhì)量濃度為0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液,物質(zhì)的量濃度分別為2mol/L和0.015mol/L的NaCl溶液,二苯胺試劑;燒杯(100mL,1個(gè), 50mL, 500mL,各2個(gè)),漏斗,試管(20mL,2個(gè)),玻璃棒,滴管,量筒(100mL,1個(gè)),紗布,鑷子,濾紙,鐵架臺(tái),鐵環(huán),三角架,酒精燈,石棉網(wǎng),載玻片,試管夾。
高考生物必備知識(shí)點(diǎn):DNA提取與鑒定問題的解題技巧
例1:下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)原理與方法的敘述,錯(cuò)誤的是()
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度隨著溶液濃度的減小而減小
B.向雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水的目的是使其吸水漲破,釋放出其中的DNA
C.向?yàn)V液中加入冷卻酒精的目的是除去DNA中的雜質(zhì),純化DNA
D.向初步純化的DNA中加入二苯胺溶液,沸水浴后可觀察到溶液顯藍(lán)色
解析:DNA在0.14 mol·L-1的NaCl溶液中溶解度最小,在低于或高于這個(gè)濃度的條件下溶解度都會(huì)增大。向雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水的目的是使其吸水漲破,釋放其中的DNA。利用DNA不溶于酒精而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精的原理,向?yàn)V液中加入冷卻酒精可進(jìn)一步將DNA與蛋白質(zhì)分離開,獲得較純的DNA。鑒定DNA的方法是向DNA中加入二苯胺溶液,沸水浴加熱,溶液變藍(lán)。
答案:A
(1)雞血細(xì)胞是進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)較好的實(shí)驗(yàn)材料,這是因?yàn)?.從雞血細(xì)胞中釋放出核物質(zhì)的處理方法是:
(2)圖a表示釋放核物質(zhì)后進(jìn)行過濾的過程,過濾后取 進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn).
(3)圖b表示的相關(guān)操作過程中,加入2mol/LNaCl溶液的作用是:
(4)圖c表示在濾液中加入冷卻的95%的酒精,其目的是 .
答案:(1)雞血細(xì)胞核的DNA含量豐富,材料易得(以及雞血細(xì)胞極易吸水脹破) 向雞血細(xì)胞中加入蒸餾水,并攪拌
(2)濾液
(3)溶解DNA分子
(4)提取雜交更少DNA(或去除脂溶性雜質(zhì))
解析:(1)根據(jù)DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中材料選擇的原則,雞血細(xì)胞核的DNA含量豐富,材料易得(以及雞血細(xì)胞極易吸水脹破),因此雞血細(xì)胞是進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)較好的實(shí)驗(yàn)材料.要從雞血細(xì)胞中釋放出核物質(zhì),需要向雞血細(xì)胞中加入蒸餾水,讓紅細(xì)胞吸水漲破,并攪拌加速紅細(xì)胞的破裂.
(2)圖a表示釋放核物質(zhì)后進(jìn)行過濾的過程,此時(shí)DNA溶解在氯化鈉溶液中,因此過濾后取濾液進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn).
(3)圖b表示的相關(guān)操作過程中,加入2mol/LNaCl溶液的作用是溶解DNA分子.
(4)圖c表示在濾液中加入冷卻的95%的酒精,由于DNA不溶于酒精,而其它雜質(zhì)可以溶于酒精,因此可以提取雜交更少DNA(或去除脂溶性雜質(zhì)).
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