從某件事情上得到收獲以后，寫(xiě)一篇心得體會(huì)，記錄下來(lái)，這么做可以讓我們不斷思考不斷進(jìn)步。那么心得體會(huì)怎么寫(xiě)才恰當(dāng)呢？下面我?guī)痛蠹艺覍げ⒄砹艘恍﹥?yōu)秀的心得體會(huì)范文，我們一起來(lái)了解一下吧。
液相色譜心得體會(huì)篇一
2017年12月12日—15日我參加了島津企業(yè)管理（北京）有限公司北京分析中心組織的高效液相色譜labsolutiongs db/sc課程培訓(xùn)。非常感覺(jué)公司領(lǐng)導(dǎo)提供這樣的學(xué)習(xí)機(jī)會(huì)，使我們能系統(tǒng)地學(xué)習(xí)液相的知識(shí)，增強(qiáng)自身技能，提高工作能力。這次培訓(xùn)主要從液相色譜儀基礎(chǔ)知識(shí)、labsolutions db/cs軟件操作兩大塊去分析講解。
labsolutions db/cs軟件操作包括三部分：數(shù)據(jù)采集、數(shù)據(jù)處理、管理工具。
數(shù)據(jù)采集：主要包括分析方法和運(yùn)行控制，是我們操作中最常用的。方法的組成：方法信息、儀器/采集參數(shù)、數(shù)據(jù)分析參數(shù)、運(yùn)行時(shí)選項(xiàng)表。它包括分析一個(gè)樣品所需要的所有參數(shù)。運(yùn)行控制講解了系統(tǒng)配置及儀器開(kāi)關(guān)機(jī)的設(shè)置。
數(shù)據(jù)處理：這部分是數(shù)據(jù)分析處理和報(bào)告生成。講解了通過(guò)利用再解析、瀏覽器對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，以及報(bào)告模板編輯、報(bào)告集的創(chuàng)建和模板編輯。
老師通過(guò)上機(jī)演練，向我們?cè)敿?xì)講解數(shù)據(jù)采集和數(shù)據(jù)處理中的方法的建立、數(shù)據(jù)采集、報(bào)告生成等內(nèi)容。并讓我們自己上機(jī)操作，對(duì)幾個(gè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，利用建立標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)樣品定量分析的方法來(lái)掌握方法的建立、數(shù)據(jù)采集、報(bào)告生成和報(bào)告集建立的操作。
管理工具：管理工具主要是對(duì)儀器系統(tǒng)進(jìn)行設(shè)置，是液相儀的使用基礎(chǔ)。包括六個(gè)部分：安全策略、項(xiàng)目管理、用戶(hù)管理、儀器管理、系統(tǒng)設(shè)置、數(shù)據(jù)備份與恢復(fù)。安全策略主要用于設(shè)定labsolutions系統(tǒng)中，關(guān)于設(shè)置密碼、軟件登錄方法、未經(jīng)授權(quán)的訪問(wèn)對(duì)應(yīng)方法、審查追蹤功能、文件訪問(wèn)限制和在分析結(jié)果中顯示簽名等信息。因?yàn)榉ㄒ?guī)對(duì)這部分有要求，因此對(duì)這部分進(jìn)行了詳細(xì)講解。
通過(guò)這部分的學(xué)習(xí)，對(duì)labsolutions軟件有了更深入和全面的了解，從液相基本的數(shù)據(jù)采集和數(shù)據(jù)處理，再到軟件的系統(tǒng)管理。在實(shí)際應(yīng)用中能更好的去設(shè)置和使用。
液相色譜儀基礎(chǔ)知識(shí)包括四部分：色譜基礎(chǔ)知識(shí)、硬件基礎(chǔ)知識(shí)、定量基礎(chǔ)知識(shí)、維護(hù)基礎(chǔ)知識(shí)。
色譜基礎(chǔ)知識(shí):從色譜的起源和發(fā)展，到高效液相色譜的簡(jiǎn)易流程圖和它的原理及特點(diǎn)，如疏水性，流動(dòng)相，固定相極性對(duì)分離度的影響，相互作用力，水，有機(jī)溶劑的選擇及緩沖鹽的配制。以及高效液相色譜的分類(lèi)，包括反相色譜，離子對(duì)色譜，正相色譜，離子交換色譜，尺寸排阻色譜等。通過(guò)這堂課的學(xué)習(xí)，增強(qiáng)了我們的理論知識(shí)，對(duì)高效液相色譜的原理大有了解。其中講解的各種因素對(duì)分離度的影響，對(duì)我們?cè)谄綍r(shí)的工作中，在流動(dòng)相的選擇和其他實(shí)驗(yàn)條件的摸索有很大幫助。
硬件基礎(chǔ)知識(shí):學(xué)習(xí)高效液相色譜構(gòu)成高效液相色譜構(gòu)成:(1)儲(chǔ)液瓶和溶劑；(2)脫氣機(jī)；(3)輸液泵；(4)色譜柱；(5)檢測(cè)器；(6)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。每一部分都有相關(guān)使用要求：流動(dòng)相要選擇恰當(dāng)，ph要符合范圍，流動(dòng)相使用前要過(guò)濾和脫氣。對(duì)于不同性質(zhì)的樣品要選擇不同的色譜柱以及對(duì)色譜柱的維護(hù)，如果走過(guò)緩沖鹽，那一定要先用高比例的水來(lái)置換掉里面的鹽后才能用有機(jī)溶劑來(lái)沖洗，在使用緩沖鹽之前也要用高比例的水來(lái)沖洗。
檢測(cè)器分為通用型和高選擇性、高靈敏度的。高選擇性、高靈敏度：紫外可見(jiàn)光檢測(cè)器，二極管陣列檢測(cè)器，熒光檢測(cè)器。通用型：示差折光檢測(cè)器，電導(dǎo)檢測(cè)器，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，質(zhì)譜檢測(cè)器等。其次，因分離的目的不同對(duì)檢測(cè)器的要求也不同。如果是定量，要用選擇性高，靈敏度高的檢測(cè)器，如果是定性或制備，則可選擇通用型的。
定量基礎(chǔ)知識(shí):詳細(xì)闡述了定量分析的基本要求，基本公式，常用定量方法(面積歸一法、外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法、標(biāo)準(zhǔn)加入法)，并通過(guò)lc solution軟件的應(yīng)用來(lái)講解樣品檢測(cè)方法的建立。常用定量方法一般分為四個(gè)步驟：一是設(shè)置儀器控制參數(shù)，包括泵參數(shù)、色譜柱參數(shù)、檢測(cè)器參數(shù)等；二是根據(jù)采集的信號(hào)設(shè)置積分功能，主要是優(yōu)化積分參數(shù)；三是設(shè)置校正參數(shù)，主要是對(duì)化合物進(jìn)行定量分析，計(jì)算其含量;四是設(shè)置報(bào)告參數(shù)，主要是結(jié)果的輸出模式。
維護(hù)基礎(chǔ)知識(shí)：主要是液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題及故障排除經(jīng)驗(yàn)，日常使用中的注意點(diǎn)及基本維護(hù)，容易出故障的部件及常見(jiàn)故障的排除等。這些問(wèn)題，都是我們平時(shí)工作時(shí)經(jīng)常遇到的，學(xué)習(xí)了這方面的知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)，能指導(dǎo)我們?cè)谌粘９ぷ髦斜ＷC儀器處于順暢的工作狀態(tài)，有效降低儀器發(fā)生故障的頻率，延長(zhǎng)儀器的使用壽命，保障檢測(cè)工作的順利進(jìn)行。最后，就這四天的培訓(xùn)進(jìn)行了理論知識(shí)的考核，并對(duì)試題進(jìn)行講解分析。并和我們一起培訓(xùn)的同行就日常工作中遇到的實(shí)際問(wèn)題與老師進(jìn)行交流討論，從實(shí)際應(yīng)用中把所學(xué)到的知識(shí)進(jìn)一步鞏固。
這次的培訓(xùn)，讓我學(xué)到了很多有關(guān)液相分析儀器的知識(shí)，使我們對(duì)液相專(zhuān)業(yè)理論知識(shí)有了更深的理解和認(rèn)識(shí)，實(shí)際操作能力得到了進(jìn)一步的提升，為我們能更好的勝任自己的工作，打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。我們將不斷學(xué)習(xí)專(zhuān)業(yè)知識(shí)、不斷完善自我，提高自身綜合能力，將所學(xué)知識(shí)應(yīng)用于實(shí)際工作當(dāng)中，為公司奉獻(xiàn)自己的一份力量。
樊 佳 2017年12月18日
液相色譜心得體會(huì)篇二
反沖色譜柱是否會(huì)降低柱效呢?
1.簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，絕大多數(shù)硅膠基質(zhì)的色譜柱,正用反用都是一樣,沒(méi)有多大區(qū)別.反著用也不會(huì)對(duì)色譜柱柱效產(chǎn)生影響。
2.小心起見(jiàn)的話，建議大家看隨色譜柱來(lái)的一小頁(yè)的說(shuō)明.上面可能都有注明該色譜柱是否可以反沖.如果沒(méi)說(shuō)，一般都是可以反沖的。
3.還有一個(gè)問(wèn)題,就是反沖后，是把柱子調(diào)回來(lái)用，還是就這么反著用呢？
在有些色譜柱壓力高的時(shí)候，反沖一段時(shí)間后，壓力下降到正常。換回正常的方向沒(méi)多久又開(kāi)始升高，這個(gè)時(shí)候，可以考慮就將色譜柱反著用。
4.有一種情況下，色譜柱不能長(zhǎng)期反沖，就是色譜柱前后篩板孔徑不一致的時(shí)候。有些3u色譜柱入口篩板孔徑可能是2u，出口0.5u。這樣可以讓色譜柱承受更大的壓力(因?yàn)槌隹诒容^小)。這種情況下，反沖一小段時(shí)間問(wèn)題不大，但是時(shí)間長(zhǎng)了以后，可能造成有些填料被沖出色譜柱，造成柱效下降的情況。如何防止這個(gè)問(wèn)題出現(xiàn)呢？ 還是那句話，看說(shuō)明書(shū)，看手冊(cè)。
rtfm！與大家共勉：）
2011.5.22 要重新開(kāi)始學(xué)習(xí)色譜的一些原理和故障診斷，開(kāi)這個(gè)帖子，跟大家分享一下學(xué)習(xí)筆記。歡迎大家交流。也算是對(duì)自己的一種監(jiān)督。學(xué)習(xí)資料來(lái)自lcgc雜志的各個(gè)專(zhuān)欄。
做液相的同學(xué)基本都會(huì)碰到分叉峰.很多時(shí)候,這都意味著硬件或者方法某些地方可能出現(xiàn)問(wèn)題.這里我們一起看看導(dǎo)致峰分叉的原因以及如何解決這個(gè)問(wèn)題的一些指導(dǎo)性的方法.1.首先,我們需要判斷,這到底是一個(gè)峰,還是兩個(gè)峰?
a圖主峰前面有一個(gè)肩峰.這到底是峰形不好,還是另外一個(gè)化合物沒(méi)分開(kāi)呢?
判斷辦法:降低該成分在樣品中的濃度.b圖是降低該成分濃度后,進(jìn)樣后得到的色譜圖.如果這是一個(gè)峰,那肩峰也應(yīng)該響應(yīng)變小.但是,這個(gè)例子里,肩峰沒(méi)有變小,這應(yīng)該是另外一個(gè)化合物.這時(shí)候,我們就要考慮如何改變方法,將這兩個(gè)東西分開(kāi).2.所有峰的峰形都不好.一般來(lái)說(shuō),一個(gè)樣品都會(huì)出多個(gè)峰.峰形不好,絕大多數(shù)時(shí)候,在每個(gè)峰上面都會(huì)出現(xiàn).比如像下面這樣:
a圖是所有峰都拖尾.b 圖是所有峰都有肩峰,也可以說(shuō)峰分叉.這種情況一般都是色譜柱頭塌陷或者柱頭的篩板被堵導(dǎo)致的.為什么導(dǎo)致峰型問(wèn)題呢? 請(qǐng)看下面的圖.a圖是正常的柱頭.b圖是篩板被堵的柱頭.正常情況下,所有樣品分子都是均勻通過(guò)色譜柱的,形成一個(gè)對(duì)稱(chēng)的峰形.堵塞得情況下,有一部分樣品分子進(jìn)入色譜柱就會(huì)收到阻擾,導(dǎo)致時(shí)間拖后,形成拖尾.對(duì)于色譜柱塌陷的情況,用同樣的方法,大家也不難理解.只不過(guò)這時(shí)候,是一些樣品分子可能跑的比正常的快了一些.如何解決這個(gè)問(wèn)題呢:
1.反沖.柱出口放空，沖20-30ml流動(dòng)相。雖然柱子上都有表明使用方向, 但是對(duì)于硅膠基質(zhì)的色譜柱,基本都可以反沖.將柱頭污染物(泵密封圈的碎屑，樣品中的污染等)沖走，就能解決問(wèn)題。當(dāng)然，還是要提倡大家注意樣品上機(jī)之前的前處理和及時(shí)更換磨損的泵密封圈。有條件的，還是用保護(hù)柱，大不了就換保護(hù)柱，也比換色譜柱強(qiáng)。
2．更換或清洗篩板。現(xiàn)在估計(jì)做這個(gè)事情的人不多，但是誰(shuí)有廢柱子，想練練也未嘗不可。
案例分析：
我們一起看看一個(gè)實(shí)際的例子。
根據(jù)之前說(shuō)的，可能是柱頭堵了，或者塌陷了。但是進(jìn)一步檢查，發(fā)現(xiàn)另有原因。方法用的150 mm 4.6 mm, 5-um c18 柱子，78% 乙腈，1.5ml/min，等度方法，進(jìn)樣10ul，100%乙腈溶解的樣品。
一般來(lái)說(shuō)，雖然10ul的純乙腈不會(huì)引起峰形不好，但是有時(shí)候樣品溶劑的極性跟流動(dòng)相差異較大時(shí)，的確會(huì)引起峰形的問(wèn)題。
我們?cè)趺崔k呢：
1． 從最容易的辦法做起，降低溶劑乙腈的比例。降到50%看看。從下圖b，4min的峰可以看出，沒(méi)啥改觀。
2． 接下來(lái)反沖柱子，結(jié)果圖c，基本沒(méi)變化。算，每天再說(shuō)吧。
3． 第二天來(lái)到實(shí)驗(yàn)室，還能干嘛呢？ 更換篩板？ 算了，直接換柱子吧。結(jié)果如d，噢，好很多噢。之前柱子肯定有問(wèn)題，扔了。但是峰還是有點(diǎn)寬，估計(jì)還是哪兒有問(wèn)題。
4． 手上忙，沒(méi)時(shí)間管這個(gè)。幾天過(guò)后，重新配了流動(dòng)相，一跑，好了。如圖e。
雖然到底什么原因?qū)е碌闹胺逍蔚膯?wèn)題已經(jīng)無(wú)從查找(柱子扔了，舊流動(dòng)相也沒(méi)了)，但是也給我們一個(gè)解決問(wèn)題的步驟：
1． 確定峰形問(wèn)題是所有峰都有問(wèn)題，還是就是某一個(gè)峰有問(wèn)題。如果所有峰都有問(wèn)題，基本都是色譜柱，或者儀器管路連接的問(wèn)題。如果是某一個(gè)峰有問(wèn)題，那就要從方法上來(lái)考慮，是否需要改變流動(dòng)相比例，ph值，色譜柱溫度等等。
2． 從最簡(jiǎn)單的做起，從不需要換什么東西的方法做起。比如改變樣品溶劑，反沖色譜柱等等。
3． 換東西。換保護(hù)柱，換色譜柱，換流動(dòng)相(新配)。一步一步的換，有助于找到問(wèn)題的根本。
4． 問(wèn)題解決后，想想需不需要采取什么措施，防止類(lèi)似問(wèn)題的發(fā)生，比如說(shuō)常換流動(dòng)相啦，即時(shí)更換密封圈啦，記錄進(jìn)樣次數(shù)了解什么時(shí)候色譜柱就不行了啊之類(lèi)的
基線噪音是做液相的同學(xué)經(jīng)常感到頭疼的問(wèn)題, 特別在做痕量分析時(shí)候.這次我們從物理,化學(xué)到電子等各個(gè)方面看看噪音的來(lái)源,以及如何減小和消除噪音.1.流動(dòng)相的在線混合.所有的流動(dòng)相在線混合都是從方便出發(fā)的結(jié)果, 流動(dòng)相混合的不充分是基線噪音的一個(gè)重要來(lái)源.混合方式主要兩種:
a.低壓混合：采取時(shí)間脈沖的方式，利用比例閥，將不同流動(dòng)相按一定比例混合。
b.高壓混合：利用多個(gè)泵頭，控制每個(gè)泵的流量，來(lái)將流動(dòng)相按一定比例混合。
在流動(dòng)相混合后，一般都有一個(gè)混合器(mixer),來(lái)幫助混合的更加充分。從流動(dòng)相開(kāi)始混合在一起，到流動(dòng)相到達(dá)色譜柱頭，這一段體積叫做延遲體積(delay volume).mixer體積越大，混合越好，但是相應(yīng)延遲體積就越大，造成梯度的延遲。換句話說(shuō)，就是流動(dòng)相的變化，需要一定時(shí)間后，才能真正到達(dá)色譜柱，對(duì)分離產(chǎn)生影響。
a.這個(gè)現(xiàn)象在使用uplc或者uhplc的時(shí)候，會(huì)有比較明顯的作用。
b.為什么相同梯度方法，在不同儀器，或者不同品牌的儀器之間轉(zhuǎn)化時(shí)，保留時(shí)間可能不一樣？ 其主要原因就是延遲體積的不同。
在線混合很難做到非常均一的混合效果，這個(gè)在示差檢測(cè)器（rid）上的效果最明顯。這也是為什么示差檢測(cè)器都要求將流動(dòng)相預(yù)混到一個(gè)瓶子里，不能走梯度的原因。
那如何減小因?yàn)榛旌隙斐傻幕€噪音呢？
a.對(duì)于等度的方法，非常簡(jiǎn)單，預(yù)混流動(dòng)相就可以了。
b.對(duì)于梯度的方法，部分預(yù)混流動(dòng)相也會(huì)幫助更好的混合，怎么做呢？看下面的例子。
方法要求乙腈/水比例從10%走到85%。那可以將流動(dòng)相a配成10%的乙腈，流動(dòng)相b配成85%的乙腈，然后a/b梯度從0%走到100%。這就是部分預(yù)混。
c.增大mixer的體積。一般mixer的體積從幾百u(mài)l到幾個(gè)ml都有，在允許的延遲時(shí)間下，更換一個(gè)體積更大的mixer，能夠有效提高混合的效率。每個(gè)色生產(chǎn)廠家的mixer體積都不一樣,基本都可以混用.有碰到過(guò)一個(gè)agilent的1100基線噪音大,后來(lái)?yè)Q成1050的mixer就好了,因?yàn)?050的mixer比較大一些.2．液相硬件問(wèn)題造成的基線噪音。
如果液相系統(tǒng)某些地方的工作不正常，也可能造成基線的噪音。
a.系統(tǒng)有漏。特別是肉眼無(wú)法發(fā)現(xiàn)的微漏或者泵的內(nèi)漏，會(huì)造成流速的變化和混合比例的變化，從而導(dǎo)致基線噪音。檢查的方法就是對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行壓力測(cè)試：將系統(tǒng)從某個(gè)地方用死堵堵上，如泵出口，或者自動(dòng)進(jìn)樣器出口，將壓力升高到350bar后停泵，監(jiān)測(cè)壓力下降的情況。一般的標(biāo)準(zhǔn)是2-3bar/min的下降是正常水平。或者15%/10min的下降。
b.梯度比例問(wèn)題?？梢詫?duì)系統(tǒng)進(jìn)行一個(gè)梯度測(cè)試，來(lái)檢查梯度混合是否準(zhǔn)確和一致。將a配成0.1%的丙酮，b是水。在265nm的波長(zhǎng)下，將a的比例10%，20%，30%這樣一個(gè)一個(gè)的升高，每個(gè)比例走3min。可以根據(jù)計(jì)算，看每個(gè)基線臺(tái)階上升是否準(zhǔn)確。也可以從0-100%走一個(gè)連續(xù)的梯度，看基線上升的平滑性和線性。
3．流動(dòng)相脫氣不好造成的基線噪音。
對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行脫氣，不僅僅是為了防止系統(tǒng)里面氣泡的產(chǎn)生。流動(dòng)相脫氣越好，基線就會(huì)越好。如今最常用的脫氣方式是在線脫氣機(jī)，但是有的時(shí)候脫氣并不徹底。所以當(dāng)有基線噪音問(wèn)題是，可以考慮采取多種的脫氣方式。
4．系統(tǒng)潔凈程度。
前面1-3點(diǎn)講的都是內(nèi)在原因，造成的基線噪音或者波動(dòng)。如果你前面的原因都找過(guò)了，問(wèn)題還沒(méi)有解決，就得考慮一下是不是流動(dòng)相里面是否有雜質(zhì)了。如何檢查判斷是否為流動(dòng)相的問(wèn)題呢？
a.每次更換一種流動(dòng)相，看基線結(jié)果。
b.重新配置所有流動(dòng)相。這種方式比較快，但可能無(wú)法找到根本原因。
要特別注意在流動(dòng)相的配置過(guò)程中，是否引入了污染，比如使用了不干凈的玻璃器皿什么的。更換溶劑的品牌和批次也是方法之一。
色譜柱長(zhǎng)期使用造成的污染有時(shí)候也會(huì)造成基線波動(dòng)。有些時(shí)候樣品里面可能有些保留非常強(qiáng)的組分，可能在色譜柱上很長(zhǎng)時(shí)間才慢慢被沖出來(lái)，這時(shí)候已經(jīng)不是一個(gè)峰了，而是基線的干擾或者波動(dòng)了。
避免這種問(wèn)題的方法：在每批樣品后，用甲醇或者已經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間沖洗色譜柱。另外，專(zhuān)柱專(zhuān)用也是一個(gè)好的習(xí)慣。如果一根色譜柱上作很多不同的樣品，也可能導(dǎo)致互相之間的污染和影響。
5．電路的噪音。
對(duì)于uv檢測(cè)器來(lái)說(shuō)，就是采樣頻率不合適而產(chǎn)生的噪音?，F(xiàn)在隨著超高效液相的普及，檢測(cè)器的采樣頻率也越來(lái)越高，有的可以達(dá)到80hz以上。但是如果一味追求高采樣頻率，可能對(duì)靈敏度沒(méi)有任何幫助，反倒產(chǎn)生比較大的噪音。(我們后面可能會(huì)有一起專(zhuān)門(mén)檢測(cè)器的時(shí)候,會(huì)更詳細(xì)的討論這個(gè)的原因)
一般來(lái)說(shuō)，我們需要保證一個(gè)色譜峰上面有15-20個(gè)點(diǎn)，來(lái)保證比較平滑的峰形和比較準(zhǔn)確的定量結(jié)果。如果我的一個(gè)峰的時(shí)間寬度是0.5min，就是是30s，那只要保證1hz的采樣頻率就足夠了。如果在uplc上面，一個(gè)峰的時(shí)間寬度是0.05min，也就是3s,就需要10hz以上的采樣頻率。那80hz的采樣頻率什么時(shí)候用呢？ 你的一個(gè)峰只有0.5s的時(shí)候。
理論上的計(jì)算是這樣的
n=16（t/w）^2
n是柱效。t是保留時(shí)間。w是峰寬。
一般色譜如果柱效12000的塔板數(shù)。在5min的時(shí)候，出峰寬度大概計(jì)算出來(lái)時(shí)11s。你可以根據(jù)計(jì)算結(jié)果來(lái)調(diào)整檢測(cè)器的合適的采樣頻率。
液相色譜心得體會(huì)篇三
儀器購(gòu)置申請(qǐng)
學(xué)院財(cái)務(wù)處、資產(chǎn)管理中心：
鑒于“江蘇省食品安全快速檢測(cè)工程技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心”項(xiàng)目進(jìn)展的實(shí)際需要，統(tǒng)籌考慮研發(fā)、社會(huì)服務(wù)和生物技術(shù)（制藥）專(zhuān)業(yè)的資源建設(shè)，申請(qǐng)購(gòu)置一臺(tái)兼具熒光和二極管陣列檢測(cè)的高效液相色譜儀，相關(guān)報(bào)告附后，請(qǐng)予以批準(zhǔn)，謝謝！
食品科學(xué)系
二o一三年三月十六日
江蘇省食品安全快速檢測(cè)工程技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心
液相色譜儀購(gòu)置報(bào)告
一、申購(gòu)背景
申請(qǐng)購(gòu)置一臺(tái)兼具熒光檢測(cè)和二極管陣列檢測(cè)的高效液相色譜儀，基于以下原因：
1.該臺(tái)儀器的購(gòu)置，是“江蘇省食品安全快速檢測(cè)工程技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心”項(xiàng)目建設(shè)的預(yù)定計(jì)劃之一，是工程中心研究、開(kāi)發(fā)、第三方服務(wù)的主要設(shè)備。投入使用后，將滿足新版國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)“gb2762-2012 食品污染物限量”，“gb 2760-2011 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)”食品中污染物、添加劑檢測(cè)的要求，其精度、準(zhǔn)確度和檢測(cè)限量是第三方檢測(cè)的必須裝備。
新版國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)gb2762-2012 食品污染物限量標(biāo)準(zhǔn)自2013年6月1日正式施行。新標(biāo)準(zhǔn)逐項(xiàng)清理了以往食品標(biāo)準(zhǔn)中的所有污染物限量規(guī)定，整合修訂為鉛、鎘、汞、砷、苯并[a]芘、n-二甲基亞硝胺等13種污染物在谷物、蔬菜、水果、肉類(lèi)、水產(chǎn)品、調(diào)味品、飲料、酒類(lèi)等20余大類(lèi)食品的限量規(guī)定。其中對(duì)食品污染物“苯并[a]芘”規(guī)定運(yùn)用高效液相色譜-熒光檢測(cè)測(cè)定可以達(dá)到很好準(zhǔn)確性、重現(xiàn)性和較低的檢測(cè)限，達(dá)到食品中“苯并[a]芘”痕量檢測(cè)的要求。
新版國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)gb 2760-2011 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)“食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)”對(duì)食品添加劑使用進(jìn)行了嚴(yán)格的規(guī)定，衛(wèi)生部發(fā)布的“食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑名單”中如羅丹明b、堿性嫩黃等禁用物質(zhì)，沒(méi)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法。應(yīng)用高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)（可實(shí)現(xiàn)三維立體）可以更好更便揵的研究食品添加劑檢測(cè)方法，并可同時(shí)準(zhǔn)確定性定量。
2.該臺(tái)儀器，對(duì)接香港中文大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院“天然產(chǎn)物與功能食品”研究項(xiàng)目組，將系統(tǒng)開(kāi)展辣椒素、花菁素、芝麻素、姜醇等天然抗氧化劑在脂肪酸、膽固醇、血脂氧化等方面的研究與應(yīng)用開(kāi)發(fā)。我院承擔(dān)的省“六大人才高峰”項(xiàng)目“天然辣椒素對(duì)血脂代謝的影響研究與開(kāi)發(fā)”、江蘇省教育廳“青藍(lán)工程”科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)“農(nóng)業(yè)投入品的監(jiān)控與篩選”等相關(guān)研究?jī)?nèi)容，將主要依賴(lài)這臺(tái)設(shè)備，相關(guān)合作，已于香港中文大學(xué)簽署科研合作協(xié)議。
3.兼顧院級(jí)重點(diǎn)建設(shè)專(zhuān)業(yè)“生物技術(shù)及應(yīng)用（制藥）”需要。該專(zhuān)業(yè)是我院重點(diǎn)建設(shè)專(zhuān)業(yè)，2012年9月第一批學(xué)生已經(jīng)入校，但是，實(shí)訓(xùn)資源建設(shè)缺口較大，特別是涉及到藥物中間體、活性成分、功能因子等成分的分離與鑒定，高精度熒光和二極管陣列檢測(cè)的高效液相色譜儀是必備工具。
二、預(yù)期效益
這臺(tái)裝備，是“江蘇省食品安全快速檢測(cè)工程技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心”科研項(xiàng)目二期建設(shè)的既定內(nèi)容，主要服務(wù)對(duì)象是科研、第三方檢測(cè)和部分必須的專(zhuān)業(yè)實(shí)踐，其效益主要體現(xiàn)在如下方面：
1.執(zhí)行“江蘇省食品安全快速檢測(cè)工程技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心”項(xiàng)目建設(shè)計(jì)劃。投入運(yùn)行后，我系將新增2-3個(gè)固定就（創(chuàng)）業(yè)崗位，滿足5-7名學(xué)生的頂崗實(shí)踐，全年將新增第三方檢測(cè)服務(wù)營(yíng)業(yè)額20-30萬(wàn)元。
2.提升科研質(zhì)量?！疤烊焕苯匪貙?duì)血脂代謝的影響研究與開(kāi)發(fā)”、“農(nóng)業(yè)投入品的監(jiān)控與篩選”等相關(guān)研究?jī)?nèi)容，將主要依賴(lài)這臺(tái)設(shè)備，國(guó)際頂尖sci期刊的研究報(bào)告，主要依賴(lài)這臺(tái)設(shè)備，社會(huì)效益較大，價(jià)值難以量化。
3.提升專(zhuān)業(yè)建設(shè)水平。生物技術(shù)及應(yīng)用（制藥）專(zhuān)業(yè)實(shí)訓(xùn)中，涉及藥物中間體、活性成分、功能因子等分離、鑒定，高精度熒光和二極管陣列檢測(cè)的高效液相色譜儀是必備工具。具有培養(yǎng)學(xué)生的功能，是實(shí)驗(yàn)（訓(xùn)）資源建設(shè)的有效補(bǔ)充。
三、建議型號(hào)與附件
1.主機(jī)系統(tǒng)：shimadzu-lc20a（與香港實(shí)驗(yàn)室相同，數(shù)據(jù)同步）；
2.附件：二元泵，脫氣機(jī)，熒光檢測(cè)，二極管陣列檢測(cè)，自動(dòng)進(jìn)樣，柱溫箱，氮吹儀，超聲波，恒溫水谷振震蕩儀等。
四、經(jīng)費(fèi)來(lái)源
1.學(xué)院“校中園”建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)20萬(wàn)元。
2.剩余款項(xiàng)（約20萬(wàn)元）擬從“食品安全快速檢測(cè)工程技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心”項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)列支。
食品科學(xué)系 二o一三年三月十六日
液相色譜心得體會(huì)篇四
高效液相色譜培訓(xùn)小結(jié)
分析：xxx 我來(lái)研究院已經(jīng)一年多，主要做基本分析操作，需要負(fù)責(zé)液相，為了嚴(yán)格保證分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，必須以嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)的態(tài)度對(duì)待，從制備樣品過(guò)程到儀器采集過(guò)程都要非常謹(jǐn)慎、認(rèn)真。
這次有幸得到公司提供的培訓(xùn)機(jī)會(huì)，去上海agilent科技大學(xué)培訓(xùn)中心參加了為期四天的液相色譜培訓(xùn)。培訓(xùn)期間老師講述了從硬件、軟件及維護(hù)保養(yǎng)各個(gè)方面的問(wèn)題，讓人一下充實(shí)了不少。
通過(guò)這次的學(xué)習(xí)培訓(xùn)，使我對(duì)分析過(guò)程有了深入的理解，并對(duì)高效液相色譜儀的使用和維護(hù)有了更全面的了解和更多的認(rèn)識(shí)，現(xiàn)在做總結(jié)如下：
液相色譜主要分為：溶劑柜、脫機(jī)機(jī)、泵、自動(dòng)進(jìn)樣器(手動(dòng)進(jìn)樣器）、柱溫箱、檢測(cè)器。各個(gè)模塊由can 線進(jìn)行通訊連接，使得各個(gè)模塊形成一整套系統(tǒng)?；瘜W(xué)工作站和儀器系統(tǒng)之間用lan線連接。
一、硬件
1、在線脫氣機(jī)
2、泵（我公司使用的是四元泵，當(dāng)使用鹽溶液和有機(jī)溶劑時(shí)，建議將鹽溶液接到四元比例閥下面的通道上（a或d），有機(jī)溶劑接到上面的通道上（b或c）。如果經(jīng)常使用鹽溶液，建議定期用水沖洗所有的通道以去除閥口上可能出現(xiàn)的鹽沉淀。）
3、進(jìn)樣器（我公司為標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)進(jìn)樣器。進(jìn)樣體積重復(fù)性高，進(jìn)樣動(dòng)態(tài)范圍寬，連續(xù)沖洗流路并有洗針功能，降低樣品殘留，可以容納不同規(guī)格的樣品瓶。靈活的進(jìn)樣程序編程可以進(jìn)行樣品前處理，使用旁路可以降低延遲體積。）
4、柱溫箱
5、檢測(cè)器（我公司使用的是vwd檢測(cè)器用于產(chǎn)品開(kāi)發(fā)及質(zhì)量控制。）
二、化學(xué)工作站
1、方法的編輯和保存
2、譜圖處理及優(yōu)化
3、積分參數(shù)優(yōu)化
4、光譜功能
5、校正表建立，設(shè)定報(bào)告，報(bào)告設(shè)計(jì)
三、日常維護(hù)和常見(jiàn)色譜故障
1、溶劑準(zhǔn)備：溶劑過(guò)濾是要防止固體顆粒損傷儀器或柱頭。常用0.45um的濾膜，使用色譜純的溶劑。定期更換溶劑，避免溶劑瓶直接日照，每?jī)商旄鼡Q或過(guò)濾溶劑，用濾膜過(guò)濾溶劑去除微生物，在使用時(shí)一定要脫氣。
2、保護(hù)色譜柱
①過(guò)濾所有的溶劑和樣品 ②使用保護(hù)柱
③儀器在使用完畢，要沖洗整個(gè)系統(tǒng)，移走系統(tǒng)中緩沖液 ④在適當(dāng)?shù)娜軇┲斜４嬷?⑤柱子在不使用時(shí)，兩端密封保存 ⑥注意色譜柱的ph值使用范圍 ⑦不要高壓沖洗柱子
⑧不要高溫下過(guò)長(zhǎng)時(shí)間使用硅膠鍵合相
3、常見(jiàn)色譜故障 ① 雙峰
原因：柱頭塌陷或柱床運(yùn)動(dòng)、柱前濾芯堵塞、樣品量過(guò)大、進(jìn)樣器流路存在分叉流路。
② 基線噪音、基線漂移
原因：檢測(cè)池臟、燈能量下降、流動(dòng)相臟、溫度不穩(wěn)定。③ 鬼峰、柱外擴(kuò)散、峰擴(kuò)展、拖尾峰、前伸峰、負(fù)峰 原因：流動(dòng)相尤其水臟、連接接頭不匹配、進(jìn)樣體積大、色譜柱過(guò)載、溶解樣品溶劑通過(guò)色譜柱時(shí)平衡破壞。
④ 壓力過(guò)高、壓力過(guò)低、壓力波動(dòng)
原因：色譜柱過(guò)濾芯被污染、毛細(xì)管進(jìn)樣針或針座阻塞、閥失靈、密封墊老化、泵內(nèi)有氣泡。
⑤ 常規(guī)維護(hù)區(qū)域：溶劑入口、泵、檢測(cè)器
四、agilent lab advisor 軟件
agilent lab advisor是獨(dú)立化學(xué)工作站之外的一個(gè)工具，這個(gè)工具提供維護(hù)、診斷、監(jiān)控及警告功能。
經(jīng)過(guò)這次的培訓(xùn)學(xué)習(xí)，使我對(duì)分析過(guò)程有了全新的認(rèn)識(shí)，也解決了以前檢測(cè)分析操作中遇到的問(wèn)題，重新認(rèn)識(shí)了許多應(yīng)用方法，對(duì)儀器的操作使用維護(hù)有了新的認(rèn)識(shí)，為以后的工作中更好地使用、養(yǎng)護(hù)儀器提供了更多理論依據(jù)。在此感謝領(lǐng)導(dǎo)，同事們對(duì)我的關(guān)心和支持，給我一個(gè)如此好的學(xué)習(xí)機(jī)會(huì)。
液相色譜心得體會(huì)篇五
高壓液相色譜hplc培訓(xùn)教程(一)i．概論
一、液相色譜理論發(fā)展簡(jiǎn)況
色譜法的分離原理是：溶于流動(dòng)相(mobile phase)中的各組分經(jīng)過(guò)固定相時(shí)，由于與固定相(stationary phase)發(fā)生作用（吸附、分配、離子吸引、排阻、親和）的大小、強(qiáng)弱不同，在固定相中滯留時(shí)間不同，從而先后從固定相中流出。又稱(chēng)為色層法、層析法。
色譜法最早是由俄國(guó)植物學(xué)家茨維特（tswett）在1906年研究用碳酸鈣分離植物色素時(shí)發(fā)現(xiàn)的，色譜法(chromatography)因之得名。后來(lái)在此基礎(chǔ)上發(fā)展出紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法。
液相色譜法開(kāi)始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相，稱(chēng)為經(jīng)典液相色譜法，此方法柱效低、時(shí)間長(zhǎng)（常有幾個(gè)小時(shí)）。高效液相色譜法(high performance liquid chromatography，hplc)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱(chēng)高壓液相色譜法(high pressure liquid chromatography，hplc)。又因分析速度快而稱(chēng)為高速液相色譜法(high speed liquid chromatography，hslp)。也稱(chēng)現(xiàn)代液相色譜。
二、hplc的特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn) hplc有以下特點(diǎn)：
高壓-壓力可達(dá)150~300kg/cm2。色譜柱每米降壓為75 kg/cm2以上。高速-流速為0.1~10.0 ml/min。
高效-可達(dá)5000塔板每米。在一根柱中同時(shí)分離成份可達(dá)100種。高靈敏度-紫外檢測(cè)器靈敏度可達(dá)0.01ng。同時(shí)消耗樣品少。hplc與經(jīng)典液相色譜相比有以下優(yōu)點(diǎn)：
速度快-通常分析一個(gè)樣品在15~30 min，有些樣品甚至在5 min內(nèi)即可完成。分辨率高-可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到最佳分離效果。
靈敏度高-紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng，熒光和電化學(xué)檢測(cè)器可達(dá)0.1pg。柱子可反復(fù)使用-用一根色譜柱可分離不同的化合物。
樣品量少，容易回收-樣品經(jīng)過(guò)色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。
三、色譜法分類(lèi)
按兩相的物理狀態(tài)可分為：氣相色譜法(gc)和液相色譜法(lc)。氣相色譜法適用于分離揮發(fā)性化合物。gc根據(jù)固定相不同又可分為氣固色譜法(gsc)和氣液色譜法(glc)，其中以glc應(yīng)用最廣。液相色譜法適用于分離低揮發(fā)性或非揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)。lc同樣可分為液固色譜法(lsc)和液液色譜法(llc)。此外還有超臨
為2.5~7.5（2~8），太高的ph值會(huì)使硅膠溶解，太低的ph值會(huì)使鍵合的烷基脫落。有報(bào)告新商品柱可在ph 1.5~10范圍操作。
正相色譜法與反相色譜法比較表
正相色譜法 反相色譜法 固定相極性 高～中 中～低 流動(dòng)相極性 低～中 中～高 組分洗脫次序 極性小先洗出 極性大先洗出
從上表可看出，當(dāng)極性為中等時(shí)正相色譜法與反相色譜法沒(méi)有明顯的界線（如氨基鍵合固定相）。3．離子交換色譜法
固定相是離子交換樹(shù)脂，常用苯乙烯與二乙烯交聯(lián)形成的聚合物骨架，在表面未端芳環(huán)上接上羧基、磺酸基（稱(chēng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂）或季氨基（陰離子交換樹(shù)脂）。被分離組分在色譜柱上分離原理是樹(shù)脂上可電離離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的離子及被測(cè)組分的離子進(jìn)行可逆交換，根據(jù)各離子與離子交換基團(tuán)具有不同的電荷吸引力而分離。
緩沖液常用作離子交換色譜的流動(dòng)相。被分離組分在離子交換柱中的保留時(shí)間除跟組分離子與樹(shù)脂上的離子交換基團(tuán)作用強(qiáng)弱有關(guān)外，它還受流動(dòng)相的ph值和離子強(qiáng)度影響。ph值可改變化合物的解離程度，進(jìn)而影響其與固定相的作用。流動(dòng)相的鹽濃度大，則離子強(qiáng)度高，不利于樣品的解離，導(dǎo)致樣品較快流出。離子交換色譜法主要用于分析有機(jī)酸、氨基酸、多肽及核酸。4．離子對(duì)色譜法
又稱(chēng)偶離子色譜法，是液液色譜法的分支。它是根據(jù)被測(cè)組分離子與離子對(duì)試劑離子形成中性的離子對(duì)化合物后，在非極性固定相中溶解度增大，從而使其分離效果改善。主要用于分析離子強(qiáng)度大的酸堿物質(zhì)。
分析堿性物質(zhì)常用的離子對(duì)試劑為烷基磺酸鹽，如戊烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉等。另外高氯酸、三氟乙酸也可與多種堿性樣品形成很強(qiáng)的離子對(duì)。
分析酸性物質(zhì)常用四丁基季銨鹽，如四丁基溴化銨、四丁基銨磷酸鹽。
離子對(duì)色譜法常用ods柱（即c18），流動(dòng)相為甲醇-水或乙腈-水，水中加入3~10 mmol/l的離子對(duì)試劑，在一定的ph值范圍內(nèi)進(jìn)行分離。被測(cè)組分保時(shí)間與離子對(duì)性質(zhì)、濃度、流動(dòng)相組成及其ph值、離子強(qiáng)度有關(guān)。5．排阻色譜法
固定相是有一定孔徑的多孔性填料，流動(dòng)相是可以溶解樣品的溶劑。小分子量的化合物可以進(jìn)入孔中，滯留時(shí)間長(zhǎng)；大分子量的化合物不能進(jìn)入孔中，直接隨流動(dòng)相流出。它利用分子篩對(duì)分子量大小不同的各組分排阻能力的差異而完成分離。常用于分離高分子化合物，如組織提取物、多肽、蛋白質(zhì)、核酸等。
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