當(dāng)工作或?qū)W習(xí)進(jìn)行到一定階段或告一段落時(shí)，需要回過頭來對所做的工作認(rèn)真地分析研究一下，肯定成績，找出問題，歸納出經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，提高認(rèn)識(shí)，明確方向，以便進(jìn)一步做好工作，并把這些用文字表述出來，就叫做總結(jié)。優(yōu)秀的總結(jié)都具備一些什么特點(diǎn)呢？又該怎么寫呢？以下是小編為大家收集的總結(jié)范文，僅供參考，大家一起來看看吧。
細(xì)胞凋亡總結(jié) 細(xì)胞凋亡分析篇一
磷脂酰絲氨酸（phosphatidylserine, ps）正常位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在細(xì)胞凋亡的早期，ps可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中(圖3)。annexin-v是一種分子量為35~36kd的ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與ps高親和力特異性結(jié)合。將annexin-v進(jìn)行熒光素（fitc、pe）或biotin標(biāo)記，以標(biāo)記了的annexin-v作為熒光探針，利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。
ps轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外不是凋亡所獨(dú)特的，也可發(fā)生在細(xì)胞壞死中。兩種細(xì)胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細(xì)胞膜是完好的，而細(xì)胞壞死在其早期階段細(xì)胞膜的完整性就破壞了。
碘化丙啶(propidine iodide, pi)是一種核酸染料，它不能透過完整的細(xì)胞膜，但在凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞，pi能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核紅染。因此將annexin-v與pi匹配使用，就可以將凋亡早晚期的細(xì)胞以及死細(xì)胞區(qū)分開來。
在雙變量流式細(xì)胞儀的散點(diǎn)圖上，左下象限顯示活細(xì)胞，為（fitc-/pi-）；右上象限是非活細(xì)胞，即壞死細(xì)胞，為（fitc+/pi+）；而右下象限為早期凋亡細(xì)胞，顯現(xiàn)（fitc+/pi-）。右上象限為獨(dú)立的核（fitc-/pi+）。
annexin-v可以再鈣離子存在的情況下，和細(xì)胞表面外翻的磷脂酰絲氨酸結(jié)合，而磷脂酰絲氨酸的外翻是細(xì)胞凋亡的早期事件。
pi是一種dna染料，當(dāng)細(xì)胞凋亡的晚期，細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增加，pi從而進(jìn)入細(xì)胞核與dna結(jié)合。
所以
annexin-v陰性-pi陰性 代表正常細(xì)胞
annexin-v陽性-pi陰性 代表凋亡早期的細(xì)胞
annexin-v陽性-pi陽性 代表凋亡晚期的細(xì)胞或壞死的細(xì)胞
annexin-v陰性-pi陽性 一般不存在這一群細(xì)胞，如果出現(xiàn)這一團(tuán)細(xì)胞可能是pi標(biāo)記時(shí)間過長，或者操作過于劇烈而傷害到原本正常的細(xì)胞。（還有一種說法是凋亡最后階段的細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)沒有細(xì)胞膜了說以不結(jié)合annexin-v而只結(jié)合pi）
2.線粒體膜電位變化的檢測
實(shí)驗(yàn)原理
jc-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△ψm的理想熒光探針?？梢詸z測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時(shí)，jc-1 聚集在線粒體的基質(zhì)(matrix)中，形成聚合物(j-aggregates)，可以產(chǎn)生紅色熒光（fl-2 通道）；在線粒體膜電位較低時(shí)，jc-1 不能聚集在線粒體的基質(zhì)中，此時(shí)jc-1 為單體(monomer)，可以產(chǎn)生綠色熒光（fl-1 通道）。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)標(biāo)志性事件。通過 jc-1 從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測到細(xì)胞膜電位的下降，同時(shí)也可以用jc-1 從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測指標(biāo)。
jc-1 單體的最大激發(fā)波長為 514nm，最大發(fā)射波長為 527nm；jc-1 聚合物(j-aggregates)的最大激發(fā)波長為 585nm，最大發(fā)射波長為 590nm。
a-c 為對照，細(xì)胞亞群(r1)在 fl-2和fl-1 通道同時(shí)顯示 jc-1 的熒光信號(hào)。d-f 顯示 jc-1在fl-2通道熒光信號(hào)降低的細(xì)胞亞群(r2)顯著增加，證明線粒體膜電位△ψm 下降，細(xì)胞發(fā)生凋亡。凋亡與線粒體膜電位的去極化相關(guān)。細(xì)胞凋亡時(shí)線粒體膜電位發(fā)生去極化，jc-1進(jìn)入線粒體以單體形式存在，僅在fl-1通道有熒光。
檢測原理
正常細(xì)胞：jc-1聚集在線粒體內(nèi)，形成多聚體，呈鮮紅色熒光，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有綠色；即紅光++，綠光++。
凋亡細(xì)胞：由于線粒體跨膜電位的破壞，不能聚集到線粒體內(nèi)，紅色熒光減弱，單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光。即紅光+，綠光++
3、caspase-3活性的檢測
caspase家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用，其中caspase-3為關(guān)鍵的執(zhí)行分子，它在凋亡信號(hào)傳導(dǎo)的許多途徑中發(fā)揮功能。caspase-3正常以酶原（32kd）的形式存在于胞漿中，在凋亡的早期階段，它被激活，活化的caspase-3由兩個(gè)大亞基（17kd）和兩個(gè)小亞基（12kd）組成，裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。但在細(xì)胞凋亡的晚期和死亡細(xì)胞，caspase-3的活性明顯下降。
(1)western blot 分析procaspase-3的活化，以及活化的caspase-3及對底物多聚adp-核糖聚合酶[poly（adp-ribose）polymerase，parp]等的裂解。
(2)熒光分光光度計(jì)分析
檢測原理：活化的caspsae與其特異性底物devd-pna結(jié)合切割，釋放出游離pna，通過測定其吸光度，根據(jù)其發(fā)光強(qiáng)度的高低代表其活化程度。
(3)流式細(xì)胞術(shù)分析
pharmingen 多克隆或單克隆 caspase-3 抗體可以識(shí)別 caspase-3 活化形式，它特異性識(shí)別由無活性的 pro-caspase-3 活化水解后的暴露的斷裂端, 熒光標(biāo)記多克隆兔抗 active-caspase-3 抗體為流式細(xì)胞術(shù)分析凋亡細(xì)胞的 caspase-3 而設(shè)計(jì)。1、2、3是早期凋亡現(xiàn)象；
4、5是晚期凋亡現(xiàn)象。
4、tunel法(末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dutp缺口末端標(biāo)記)
細(xì)胞凋亡中, 染色體dna雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量粘性3'-oh末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（tdt）的作用下將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到dna的3'-末端，從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測，這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法（terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, tunel）。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有dna的斷裂，因而沒有3'-oh形成，很少能夠被染色。tunel實(shí)際上是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法，對完整的單個(gè)凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色，能準(zhǔn)確地反應(yīng)細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征，可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yǎng)的細(xì)胞和從組織中分離的細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)測定，并可檢測出極少量的凋亡細(xì)胞，因而在細(xì)胞凋亡的研究中被廣泛采用。
5、dna ladder 細(xì)胞凋亡晚期，核酸內(nèi)切酶在核小體之間剪切核dna，產(chǎn)生大量長度在180-200 bp 的dna片段。細(xì)胞經(jīng)處理后，采用常規(guī)方法分離提純dna，進(jìn)行瓊脂糖凝膠和溴化乙啶染色，在凋亡細(xì)胞群中可觀察到典型的dna ladder。在瓊脂糖凝膠電泳上表現(xiàn)為梯形電泳圖譜(dna ladder)。壞死細(xì)胞---連續(xù)性條帶。
一、形態(tài)學(xué)觀察方法
1、he染色、光鏡觀察：凋亡細(xì)胞呈圓形，胞核深染，胞質(zhì)濃縮，染色質(zhì)成團(tuán)塊狀，細(xì)胞表面有“出芽”現(xiàn)象?！咎K木精 — 伊紅染色法，(hematoxylin-eosin staining)，簡稱he染色法。蘇木精染液為堿性，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ；伊紅為酸性染料，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色?！?/p>
2、丫啶橙（ao）染色，熒光顯微鏡觀察：活細(xì)胞核呈黃綠色熒光，胞質(zhì)呈紅色熒光。凋亡細(xì)胞核染色質(zhì)呈黃綠色濃聚在核膜內(nèi)側(cè)，可見細(xì)胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。
3、臺(tái)盼藍(lán)染色：如果細(xì)胞膜不完整、破裂，臺(tái)盼藍(lán)染料進(jìn)入細(xì)胞，細(xì)胞變藍(lán)，即為壞死。如果細(xì)胞膜完整，細(xì)胞不為臺(tái)盼藍(lán)染色，則為正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞。此方法對反映細(xì)胞膜的完整性，區(qū)別壞死細(xì)胞有一定的幫助。
4、透射電鏡觀察：可見凋亡細(xì)胞表面微絨毛消失，核染色質(zhì)固縮、邊集，常呈新月形，核膜皺褶，胞質(zhì)緊實(shí)，細(xì)胞器集中，胞膜起泡或出“芽”及凋亡小體和凋亡小體被臨近巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象。
一、細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測
1、光學(xué)顯微鏡和倒置顯微鏡
（1）未染色細(xì)胞：凋亡細(xì)胞的體積變小、變形，細(xì)胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象，細(xì)胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細(xì)胞出現(xiàn)皺縮、變圓、脫落。
（2）染色細(xì)胞：常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細(xì)胞的染色質(zhì)濃縮、邊緣化，核膜裂解、染色質(zhì)分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態(tài)。
2、熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡
一般以細(xì)胞核染色質(zhì)的形態(tài)學(xué)改變?yōu)橹笜?biāo)來評判細(xì)胞凋亡的進(jìn)展情況。常用的dna特異性染料有：ho 33342(hoechst 33342)，ho 33258(hoechst 33258), dapi。三種染料與 dna的結(jié)合是非嵌入式的，主要結(jié)合在dna的a-t堿基區(qū)。紫外光激發(fā)時(shí)發(fā)射明亮的藍(lán)色熒光。
hoechst是與dna特異結(jié)合的活性染料，儲(chǔ)存液用蒸餾水配成1mg/ml的濃度，使用時(shí)用pbs稀釋成終濃度為2~5mg/ml。
dapi為半通透性，用于常規(guī)固定細(xì)胞的染色。儲(chǔ)存液用蒸餾水配成1mg/ml的濃度，使用終濃度一般為0.5 ~1mg/ml。
結(jié)果評判：細(xì)胞凋亡過程中細(xì)胞核染色質(zhì)的形態(tài)學(xué)改變分為三期：ⅰ期的細(xì)胞核呈波紋狀（rippled）或呈折縫樣（creased），部分染色質(zhì)出現(xiàn)濃縮狀態(tài)；ⅱa期細(xì)胞核的染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化；ⅱb期的細(xì)胞核裂解為碎塊，產(chǎn)生凋亡小體(圖1)。
3、透射電子顯微鏡觀察
結(jié)果評判：凋亡細(xì)胞體積變小，細(xì)胞質(zhì)濃縮。凋亡ⅰ期（pro-apoptosis nuclei）的細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)高度盤繞，出現(xiàn)許多稱為氣穴現(xiàn)象（cavitations）的空泡結(jié)構(gòu)(圖2)；ⅱa期細(xì)胞核的染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化；細(xì)胞凋亡的晚期，細(xì)胞核裂解為碎塊，產(chǎn)生凋亡小體。圖2
七、凋亡相關(guān)蛋白tfar19蛋白的表達(dá)和細(xì)胞定位分析
tfar19（pdcd5）是由本研究室在國際上首先報(bào)導(dǎo)的一個(gè)擁有自己知識(shí)產(chǎn)權(quán)的人類新基因，前期的功能研究表明，它是促進(jìn)細(xì)胞凋亡的增強(qiáng)劑。利用熒光素（fitc）標(biāo)記的tfar19單克隆抗體為探針，對細(xì)胞凋亡過程中tfar19蛋白的表達(dá)水平及定位研究發(fā)現(xiàn)，凋亡早期tfar19表達(dá)水平增高并出現(xiàn)快速核轉(zhuǎn)位現(xiàn)象，伴隨著細(xì)胞核形態(tài)學(xué)的變化，持續(xù)較長時(shí)間，在凋亡小體中仍然可見。同時(shí)我們發(fā)現(xiàn)，凋亡早期tfar19蛋白的核轉(zhuǎn)位早于磷脂酰絲氨酸（ps）外翻和細(xì)胞核dna的片段化，提示tfar19蛋白的核轉(zhuǎn)位是細(xì)胞凋亡更早期發(fā)生的事件之一。進(jìn)一步的研究證明，凋亡早期tfar19的核轉(zhuǎn)位具有普遍意義，不同細(xì)胞凋亡早期均出現(xiàn)tfar19高表達(dá)和核轉(zhuǎn)位。這為研究細(xì)胞凋亡早期所發(fā)生的事件，提供了一種新的技術(shù)和指標(biāo)。
細(xì)胞凋亡總結(jié) 細(xì)胞凋亡分析篇二
細(xì)胞凋亡 凋亡（apoptosis）一般是指機(jī)體細(xì)胞在發(fā)育過程中或在某些因素作用下，通過細(xì)胞內(nèi)基因及其產(chǎn)物的調(diào)控而發(fā)生的一種程序性細(xì)胞死亡(programmed cell death)。一般表現(xiàn)為單個(gè)細(xì)胞的死亡，且不伴有炎癥反應(yīng)。
1．細(xì)胞凋亡的意義 細(xì)胞凋亡普遍存在于生物界，既發(fā)生于生理狀態(tài)下，也發(fā)生于病理狀態(tài)下。由于細(xì)胞凋亡對胚胎發(fā)育及形態(tài)發(fā)生（morphogenesis）、組織內(nèi)正常細(xì)胞群的穩(wěn)定、機(jī)體的防御和免疫反應(yīng)、疾病或中毒時(shí)引起的細(xì)胞損傷、老化、腫瘤的發(fā)生進(jìn)展起著重要作用，并具有潛在的治療意義，至今仍是生物醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。細(xì)胞凋亡過多可引起疾病發(fā)生，如：①愛滋病的發(fā)展過程中，cd4+t細(xì)胞數(shù)目的減少；②移植排斥反應(yīng)中，細(xì)胞毒性t細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞死亡；③缺血及再灌注損傷，導(dǎo)致心肌細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞的凋亡增多；④神經(jīng)系統(tǒng)退化性疾病（alzheimer病、parkinson's病）的重要原因是細(xì)胞凋亡的異常增加。神經(jīng)細(xì)胞的凋亡參與老化及alzheimer病的發(fā)生。alzheimer氏病是一種常見的老年病，患者在臨床上表現(xiàn)為進(jìn)行性的智力減退。⑤暴露于電離輻射可引起多種組織細(xì)胞的凋亡。細(xì)胞凋亡過少也可引起疾病發(fā)生：在腫瘤的發(fā)生過程中，誘導(dǎo)凋亡的基因如p53等失活、突變，而抑制凋亡的基因如bcl-2等過度表達(dá)，都會(huì)引起細(xì)胞凋亡顯著減少，在腫瘤發(fā)病學(xué)中具有重要意義；針對自身抗原的淋巴細(xì)胞的凋亡障礙可導(dǎo)致自身免疫性疾病；某些病毒能抑制其感染細(xì)胞的凋亡而使病毒存活。
2．細(xì)胞凋亡的形態(tài)變化 電鏡下細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化是多階段的，可分為 ①細(xì)胞漿濃縮，核糖體、線粒體等聚集，細(xì)胞體積縮小，結(jié)構(gòu)更加緊密； ②染色質(zhì)逐漸凝聚成新月狀附于核膜周邊，嗜堿性增強(qiáng)。細(xì)胞核固縮呈均一的致密物，進(jìn)而斷裂為大小不一的片段：
③胞膜不斷出芽、脫落，細(xì)胞變成數(shù)個(gè)大小不等的由胞膜包裹的凋亡小體(apoptotic bodies)。凋亡小體內(nèi)可含細(xì)胞漿、細(xì)胞器和核碎片，有的不含核碎片；④凋亡小體被具有吞噬功能的細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞等吞噬、降解： ⑤凋亡發(fā)生過程中，細(xì)胞膜保持完整，細(xì)胞內(nèi)容物不釋放出來，所以不引起炎癥反應(yīng)。左圖 典型凋亡小體：染色質(zhì)呈新月狀，并可見細(xì)胞器 右圖 凋亡細(xì)胞：凋亡細(xì)胞(↑)與鄰近細(xì)胞分離 細(xì)胞凋亡 光鏡下凋亡一般累及單個(gè)或少數(shù)幾個(gè)細(xì)胞，凋亡細(xì)胞呈圓形，胞漿紅染，細(xì)胞核染色質(zhì)聚集成團(tuán)塊狀。由于凋亡細(xì)胞迅速被吞噬，又無炎癥反應(yīng)，因此，在常規(guī)切片檢查時(shí)，一般不易發(fā)現(xiàn)，但在某些組織如反應(yīng)性增生的次級淋巴濾泡生發(fā)中心則易見到。病毒性肝炎時(shí)，嗜酸性小體形成即是細(xì)胞凋亡。
3．細(xì)胞凋亡的機(jī)制 細(xì)胞凋亡是一系列依賴能量的分子水平變化的終點(diǎn)，細(xì)胞凋亡過程包括以下4個(gè)階段，即：誘導(dǎo)啟動(dòng)、細(xì)胞內(nèi)調(diào)控、實(shí)施和凋亡細(xì)胞的吞噬搬運(yùn)階段。
（1）誘導(dǎo)啟動(dòng) 引起凋亡的信號(hào)可以來自細(xì)胞外，通過跨膜傳導(dǎo)對細(xì)胞內(nèi)的調(diào)控分子起作用；也可以直接作用于細(xì)胞內(nèi)的靶分子。一些跨膜作用的抑制因子(如生長因子、某些激素、細(xì)胞因子、某些病毒蛋白等)具有抑制凋亡的作用，有利于細(xì)胞的生存。當(dāng)這些因子缺乏時(shí)，會(huì)激發(fā)細(xì)胞凋亡。另外一些跨膜作用的刺激因子通過受體與配體的結(jié)合而激活細(xì)胞凋亡程序，其中最重要的是腫瘤壞死因子受體家族。此外，尚有多種其它凋亡誘導(dǎo)因子。在胚胎發(fā)育過程中，形態(tài)發(fā)生蛋白、生長因子、分化因子對細(xì)胞凋亡可起促進(jìn)作用，又可起抑制作用。
（2）細(xì)胞內(nèi)調(diào)控 細(xì)胞內(nèi)的某些特異蛋白與細(xì)胞死亡信號(hào)相連接，這些特異蛋白對細(xì)胞的死亡與否起決定作用。bcl-2蛋白家族(bcl-2 family of proteins)是調(diào)節(jié)線粒體通透性的主要成分，通過形成同源(bcl-2/bcl-2, bax/bax)和異源(bcl-2/bax)二聚體對細(xì)胞凋亡進(jìn)行調(diào)控。bcl-2同源二聚體抑制細(xì)胞凋亡，bax同源二聚體促進(jìn)細(xì)胞凋亡。此外，細(xì)胞表面受體fas(cd95)，屬tnfr家族，當(dāng)免疫細(xì)胞產(chǎn)生的fas的配體與t細(xì)胞表面的fas結(jié)合時(shí)，也啟動(dòng)了死亡程序。這種fas-fas配體介導(dǎo)的凋亡在清除免疫反應(yīng)(如自身免疫病)中被激活的淋巴細(xì)胞非常重要。細(xì)胞凋亡后的梯狀dna 足葉乙甙誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡后的梯狀dna
（3）凋亡的實(shí)施 細(xì)胞凋亡的實(shí)施是通過蛋白水解的一系列連鎖反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的。各種組織的細(xì)胞凋亡都要激活caspase家族。caspase成員作為酶原的形式存在于細(xì)胞內(nèi)，經(jīng)裂解激活后，迅速啟動(dòng)序列性酶解死亡程序，裂解細(xì)胞骨架和細(xì)胞核蛋白基質(zhì)并激活了核酸內(nèi)切酶。在內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶作用下，dna進(jìn)行有控降解，產(chǎn)生長度為180～200 bp整倍數(shù)的dna片段，這正好是纏繞組蛋白多聚體的長度，提示染色質(zhì)dna恰好是在核小體與核小體連接部被切斷。dna瓊脂糖凝膠電泳出現(xiàn)ladder也成為檢測凋亡發(fā)生的重要標(biāo)志。
（4）凋亡細(xì)胞的吞噬搬運(yùn) 凋亡細(xì)胞碎片的表面有標(biāo)志分子(血小板反應(yīng)素、粘附糖蛋白)有利于臨近的巨噬細(xì)胞以及其他細(xì)胞的識(shí)別、吞噬和處理。凋亡細(xì)胞的吞噬搬運(yùn)過程非常有效而迅速，凋亡細(xì)胞很快消失，不留痕跡，也無炎癥反應(yīng)。
4．細(xì)胞凋亡與壞死的區(qū)別 凋亡 壞死
1機(jī)制 基因調(diào)控的程序化（programmed）細(xì)胞死亡，主動(dòng)進(jìn)行（自殺性）意外事故性（accident）細(xì)胞死亡，被動(dòng)進(jìn)行（他殺性）
2誘因 生理性或輕微病理性刺激因子誘導(dǎo)發(fā)生，如生長因子缺乏 病理性刺激因子誘導(dǎo)發(fā)生，如缺氧、感染、中毒 死亡范圍 多為散在的單個(gè)細(xì)胞 多為聚集的大片細(xì)胞
3形態(tài)特征 細(xì)胞固縮，核染色質(zhì)邊集，細(xì)胞膜及各細(xì)胞器膜完整，膜可發(fā)泡成芽，形成凋亡小體 細(xì)胞腫脹，核染色質(zhì)絮狀或邊集，細(xì)胞膜及各細(xì)胞器膜溶解破壞，溶酶體酶釋放，細(xì)胞自溶
4生化特征 耗能的主動(dòng)過程，有新蛋白合成，dna早期規(guī)律降解為180-200bp片段，瓊脂凝膠電泳呈特征性梯帶狀 不耗能的被動(dòng)過程，無新蛋白合成，dna降解不規(guī)律，片段大小不一，瓊脂凝膠電泳不呈梯帶狀
5周圍反應(yīng) 不引起周圍組織炎癥反應(yīng)和修復(fù)再生，但凋亡小體可被鄰近細(xì)胞吞噬 引起周圍組織炎癥反應(yīng)和修復(fù)再生
細(xì)胞自噬
細(xì)胞自噬的生理功能
1及時(shí)清除細(xì)胞中隨時(shí)產(chǎn)生的“垃圾”（如破損或衰老的細(xì)胞器、長壽命蛋白質(zhì)、合成錯(cuò)誤或折疊錯(cuò)誤的蛋白質(zhì)等），2維持細(xì)胞自穩(wěn)狀態(tài).無論是腫瘤細(xì)胞還是正常細(xì)胞，保持一種基礎(chǔ)、低水平的自噬活性是至關(guān)重要的
3.同時(shí)，自噬的產(chǎn)物，如氨基酸、脂肪酸等小分子物質(zhì)，又可為細(xì)胞提供一定的能量和合成底物.可以說，細(xì)胞自噬就是一個(gè)“備用倉庫”.鑒于上述作用，在正常生理情況下，細(xì)胞自噬可以幫助細(xì)胞在缺乏營養(yǎng)的惡劣環(huán)境中生存.自噬也可為腫瘤細(xì)胞帶來幾大好處：
（1）首先，腫瘤細(xì)胞本身就具有高代謝的特點(diǎn)，對營養(yǎng)和能量的需求比正常細(xì)胞更高，但腫瘤微環(huán)境往往不能如意，如腫瘤發(fā)生初始期到血管發(fā)生之前、腫瘤長大發(fā)生血管崩塌時(shí)、腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)灶游走時(shí)等都會(huì)出現(xiàn)營養(yǎng)不足或供應(yīng)中斷，而此時(shí)提高自噬活性可以有助于度過這一危機(jī)
（2）（2）當(dāng)化療、放療后，腫瘤細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生大量的破損細(xì)胞器、損壞的蛋白質(zhì)等有害成分，此時(shí)提高自噬活性可及時(shí)清除這些有害物質(zhì)，并提供應(yīng)急的底物和能量為修復(fù)受損dna贏得時(shí)間和條件.(3)另外，抑制細(xì)胞自噬可以導(dǎo)致細(xì)胞更容易發(fā)生凋亡，然而，細(xì)胞自噬在腫瘤的生成和癌癥的發(fā)展中到底扮演怎樣的角色，目前還沒有取得廣泛一致的意見.細(xì)胞自噬可以抑制細(xì)胞發(fā)生癌變，可能產(chǎn)生于以下幾種機(jī)制
(1)細(xì)胞自噬的抑制會(huì)加重壞死細(xì)胞的局部炎癥反應(yīng)，從而導(dǎo)致腫瘤的生長(2)而細(xì)胞自噬可以清除壞死的細(xì)胞器，調(diào)整內(nèi)源性的壓力，從而穩(wěn)定基因組,減少細(xì)胞向癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)變.(3)細(xì)胞自噬既可以加強(qiáng)細(xì)胞檢驗(yàn)點(diǎn)的檢查作用，又起到了穩(wěn)定基因組的作用，從而減少了細(xì)胞的癌變
細(xì)胞凋亡總結(jié) 細(xì)胞凋亡分析篇三
課程報(bào)告
都在說二十一世紀(jì)是生命科學(xué)的世紀(jì)，很榮幸能夠進(jìn)入生物科學(xué)這個(gè)行業(yè)。
關(guān)于對自己所學(xué)專業(yè)，可能最初是興趣讓我來到這個(gè)專業(yè)，不是太清楚為什么會(huì)對這個(gè)專業(yè)有這么大的熱情，但真的很喜歡它。生物技術(shù)，最官方的定義是指人們以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合其他基礎(chǔ)科學(xué)的科學(xué)原理，采用先進(jìn)的科學(xué)技術(shù)手段，按照預(yù)先的設(shè)計(jì)改造生物體或加工生物原料，為人類生產(chǎn)出所需產(chǎn)品或達(dá)到某種目的。生物技術(shù)是人們利用微生物、動(dòng)植物體對物質(zhì)原料進(jìn)行加工，以提供產(chǎn)品來為社會(huì)服務(wù)的技術(shù)。它主要包括發(fā)酵技術(shù)和現(xiàn)代生物技術(shù)。現(xiàn)代生物技術(shù)綜合基因工程、分子生物學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、胚胎學(xué)、免疫學(xué)、有機(jī)化學(xué)、無機(jī)化學(xué)、物理化學(xué)、物理學(xué)、信息學(xué)及計(jì)算機(jī)科學(xué)等多學(xué)科技術(shù)，可用于研究生命活動(dòng)的規(guī)律和提供產(chǎn)品為社會(huì)服務(wù)等。
再我自己看來生物技術(shù)其實(shí)是一個(gè)既可以看做一個(gè)基礎(chǔ)學(xué)科也可以看做是一個(gè)很新興的，綜合性的學(xué)科。其實(shí)生物技術(shù)這是一個(gè)很綜合性的學(xué)科，現(xiàn)在和很多領(lǐng)域接軌，對我們而言這是機(jī)遇和挑戰(zhàn)。
對我自己而言，我想在生物技術(shù)這方面有所建樹，最主要的還是在科研方面能攻克一些難題，雖然可能現(xiàn)在想法不是太成熟但是我相信經(jīng)過幾年的磨練與努力我能夠攻破這些難題。希望能夠在大一下就能夠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，學(xué)一些基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)技能為以后自己做項(xiàng)目打下基礎(chǔ)。
然后關(guān)于自己的專業(yè)，現(xiàn)在我們所學(xué)的知識(shí)其實(shí)普遍落后，教科書的編排更新不及時(shí)，可能我們學(xué)到的東西可能學(xué)校外面已經(jīng)開始產(chǎn)業(yè)化了，測序技術(shù)已經(jīng)開始第四代了，而我們可能畢業(yè)前一年才開始學(xué)習(xí)切片制作，學(xué)習(xí)的東西很古老，再就是我們這個(gè)專業(yè)，并沒有像其他幾大理科領(lǐng)域一樣有清晰的邏輯和量化，這導(dǎo)致了很多小領(lǐng)域只有開頭和結(jié)果而沒有一個(gè)可復(fù)制的過程，而沒有可復(fù)制的過程就代表著無法帶領(lǐng)這個(gè)行業(yè)產(chǎn)業(yè)化，因此，這個(gè)行業(yè)在沒有開源的情況下就無法支撐這個(gè)領(lǐng)域下的大多數(shù)學(xué)生的溫飽，就只能節(jié)流，這樣就導(dǎo)致了本專業(yè)的人才無法繼續(xù)從事與本專業(yè)有關(guān)行業(yè)，轉(zhuǎn)而從事其他行業(yè)，從而導(dǎo)致人才流失，最終專業(yè)發(fā)展緩慢。而談到生物技術(shù)不得不說到它和其他行業(yè)接軌這一問題，的確，和其他領(lǐng)域接軌形成交叉學(xué)科是一個(gè)理想的出路，如合成生物學(xué)，生物信息學(xué)，的確給生物注入了一股生機(jī)。但是我們都知道越巨大的事物邁步子很大也很緩慢，何況在人才流失的情況下。
說到這里，可能真的學(xué)習(xí)這個(gè)專業(yè)我們更多的是在學(xué)習(xí)了基礎(chǔ)課程后，自己學(xué)習(xí)最新更新的知識(shí)，在老師的指導(dǎo)下自己收集資料自己進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，再完成項(xiàng)目。
很多人對生物技術(shù)這個(gè)專業(yè)有很多的誤解，我們在完成自己研究項(xiàng)目的同時(shí)也有義務(wù)科普大眾。畢竟這也是吸引人才的重要途徑，同時(shí)也是解決本專業(yè)人才流失的好方法。
我自己有一個(gè)不成熟的想法，很久之前曾了解到俄羅斯的“永生計(jì)劃”它的設(shè)計(jì)活體意識(shí)轉(zhuǎn)移到機(jī)器人身上，對此幾乎大多數(shù)人是不看好，不支持的。而對于這個(gè)“永生計(jì)劃” 我有一個(gè)想法，癌細(xì)胞是無限增殖，如果我們能夠完全弄清楚癌細(xì)胞的增殖過程及機(jī)理，并能夠運(yùn)用到人體衰老細(xì)胞中，對衰老細(xì)胞進(jìn)行基因修飾添加經(jīng)過改良的癌細(xì)胞中能夠無限增殖的基因，或許“永生”并非不可能。同樣的癌細(xì)胞的無限增殖基因或許也能在器官移植這一領(lǐng)域有所貢獻(xiàn)，也是利用無限增殖，讓器官細(xì)胞增殖，成長成完整的細(xì)胞?；蛟S研究出癌細(xì)胞無限增殖的機(jī)理并提取其這個(gè)基因?qū)θ祟悤?huì)有很大貢獻(xiàn)。
至于疑惑這個(gè)方面就是在教材更新?lián)Q代不及時(shí)的情況下，我們是否只能通過課外閱讀這些方式來擴(kuò)展自己的知識(shí)面，還有就是技術(shù)的更新我們是否能夠跟的上，倘若有同學(xué)本科畢業(yè)便想進(jìn)入行業(yè)工作，最新的技術(shù)他們又要從何學(xué)習(xí)。最后關(guān)于實(shí)驗(yàn)室，畢竟如果想要真的從事生物研究該如何合理利用現(xiàn)有資源來完成自己的項(xiàng)目。
最后我個(gè)人的話最想獲得的是關(guān)于癌細(xì)胞無限增殖機(jī)理方面的指導(dǎo)，和我不成熟構(gòu)想的可實(shí)施率。
以上是我個(gè)人對本專業(yè)的認(rèn)識(shí)及理解，以及對未來設(shè)想。
謝謝老師閱讀，有不正確的地方請老師批評指正。
細(xì)胞凋亡總結(jié) 細(xì)胞凋亡分析篇四
細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)技術(shù)總結(jié) 一形態(tài)學(xué)檢測
1、光學(xué)顯微鏡和倒置顯微鏡觀察法
未染色細(xì)胞:凋亡細(xì)胞體積變小、變形，膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象，晚期出現(xiàn)凋亡小體。貼壁細(xì)胞出現(xiàn)皺縮，變圓，脫落。染色細(xì)胞:姬姆薩染色，瑞氏染色等。凋亡細(xì)胞染色質(zhì)濃縮，邊緣化，核膜裂解，染色質(zhì)分割成塊狀，形成凋亡小體。
2、熒光顯微鏡檢測法-熒光染料
例如，碘化丙啶(pi)是一種核酸染料，它不能透過完整的細(xì)胞膜，但在凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞，pi 能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核紅染。選用536nm 激發(fā)光，細(xì)胞核呈紅色熒光。
3、電子顯微鏡
收集細(xì)胞，2.5%戊二醛4°c 固定24h，1%四氧化鋨后固定，丙酮梯度脫水，經(jīng)包埋劑浸透后環(huán)氧樹脂包埋，超薄切片，醋酸鈾和枸櫞酸鉛雙重染色，透射電鏡觀察。凋亡ⅰ期的細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)高度盤繞，出現(xiàn)許多稱為氣穴現(xiàn)象的空泡結(jié)構(gòu)。ⅱa 期細(xì)胞核的染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化;細(xì)胞凋亡的晚期，細(xì)胞核裂解為碎塊，產(chǎn)生凋亡小體。
4、激光掃描共焦顯微鏡技術(shù)
fitc-annexinv+pi雙染，觀察凋亡過程中細(xì)胞膜ps表面的變化，并區(qū)分正常細(xì)胞(an-pi-)，早期凋亡細(xì)胞(an+pi-)，晚期凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞(an+pi+)，細(xì)胞收集過程中出現(xiàn)的損傷細(xì)胞(an-pi+)。
二、細(xì)胞凋亡的生化及分子生物學(xué)檢測
1、dna 斷裂檢測法
如使用瓊脂糖凝膠電泳檢測，細(xì)胞凋亡時(shí)，核染色質(zhì)凝聚，染色質(zhì)dna 在核小體單位之間的連接處斷裂。凋亡早期可形成50~300kbp 的dna 大片段，晚期核酸內(nèi)切酶在核小體之間剪切核dna，產(chǎn)生大量長度在180~200bp 整數(shù)倍的寡核苷酸片段。
2、膜聯(lián)蛋白v 法
磷脂酰絲氨酸(ps)位于正常細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在細(xì)胞凋亡的早期，ps 可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜表面。annexin-ⅴ(膜聯(lián)蛋白-v)是一種分子量為35-36kd 的ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白，與ps高親和力。將annexin-ⅴ進(jìn)行熒光素或生物素標(biāo)記，以標(biāo)記了的annexin-ⅴ作為探針，利用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡以及共聚焦激光掃描顯微鏡檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。
3、細(xì)胞凋亡的酶caspase檢測
檢測caspase活力可用免疫雜交技術(shù)分析酶原的加工和底物水解的產(chǎn)物，或用人工底物檢測酶活力，也可對活化的caspase做親和標(biāo)記。例如分析底物的水解產(chǎn)物，parp(多聚adp-核糖聚合酶)第一個(gè)被認(rèn)識(shí)的caspase-3底物，它的相對分子質(zhì)量為116000，水解后形成相對分子質(zhì)量為85000 及相對分子質(zhì)量為25000 的兩個(gè)片段，用抗相對分子質(zhì)量為85000 片段的抗體檢測細(xì)胞是否發(fā)生凋亡。
4、線粒體膜勢能變化的檢測
線粒體跨膜電位的存在，使一些親脂性陽離子熒光染料可結(jié)合到線粒體基質(zhì)，其熒光的增強(qiáng)或減弱反映了線粒體內(nèi)膜電負(fù)性的增高或降低流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的熒光強(qiáng)度或熒光顯微鏡觀察，拍照正常細(xì)胞中, rh123 能夠依賴線粒體跨膜電位進(jìn)入線粒體基質(zhì)，熒光強(qiáng)度減弱或消失。而凋亡時(shí)，線粒體膜完整性破壞，線粒體膜通透性轉(zhuǎn)運(yùn)孔開放，引起線粒體跨膜電位的崩潰, rh123 重新釋放出線粒體, 從而發(fā)出強(qiáng)黃綠色熒光。
細(xì)胞凋亡總結(jié) 細(xì)胞凋亡分析篇五
【關(guān)鍵詞】細(xì)胞凋亡；中毒
【中文圖書號(hào)】d919．
4【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】b
【文章編號(hào)】1007—9297(2007)03—0232—0
3自1972年由kerr等提出細(xì)胞凋-l~?(apoptosis)的概念后。人們對細(xì)胞凋亡現(xiàn)象進(jìn)行了廣泛深入研究。
隨著醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，細(xì)胞凋亡
已成為
醫(yī)學(xué)界研究的熱點(diǎn)之一?，F(xiàn)已證實(shí)，在缺血一再灌注
損傷、創(chuàng)傷感染、全身炎癥反應(yīng)(sirs)、多臟器功能
障礙綜合征(mods)、退行性變以及中毒等中均存
在細(xì)胞凋亡的情況。目前，我國法醫(yī)界已經(jīng)開始利用
細(xì)胞凋亡理論和技術(shù)。進(jìn)行法醫(yī)毒理病理學(xué)方面的研究。f 卅
一、細(xì)胞凋亡
(一)細(xì)胞凋亡的概念
細(xì)胞凋亡又稱程序性細(xì)胞死亡(pr0grammed cell
death pcd)，是在一定的生理或病理?xiàng)l件下，細(xì)胞按
照自身既定程序主動(dòng)結(jié)束生命的一種死亡形式。是
由一些特殊信號(hào)刺激細(xì)胞內(nèi)在固有的死亡程序所誘
發(fā)的細(xì)胞主動(dòng)死亡現(xiàn)象。細(xì)胞凋亡是細(xì)胞衰老、死亡的正常生理過程，然而，許多致病因素也能導(dǎo)致凋
亡，被稱之為病理性細(xì)胞凋亡。
(二)細(xì)胞凋亡與壞死的區(qū)別
壞死(necrosis)是細(xì)胞受到強(qiáng)烈理化或生物因
素作用引起細(xì)胞無序變化的死亡過程。首先膜的通
透性增加，細(xì)胞外形不規(guī)則變化，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，核染
色質(zhì)位移，細(xì)胞核和線粒體腫脹，溶酶體破壞，細(xì)胞
膜破裂，胞漿外溢，壞死的細(xì)胞被巨噬細(xì)胞吞噬，引
起周圍組織不同程度的炎癥反應(yīng)。
凋亡是細(xì)胞對環(huán)境的生理性病理性刺激信號(hào)，環(huán)境條件的變化或緩和性損傷產(chǎn)生的應(yīng)答有序變化的死亡過程。首先是染色質(zhì)的凝集，嗜堿性染色增
強(qiáng)，細(xì)胞核崩解。線粒體保持形態(tài)正常。最后細(xì)胞收
縮變圓，胞體變小，染色質(zhì)固縮，凝集至核膜周邊，胞
漿濃縮，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張并與細(xì)胞膜融合，核仁裂解，細(xì)
胞皺縮，繼之細(xì)胞內(nèi)陷將細(xì)胞分割成大小不等的、多
個(gè)具有膜包囊的細(xì)胞凋亡小體fapoptotic micro—
body)。他們從細(xì)胞表面出芽脫落，并被吞噬細(xì)胞、上
皮細(xì)胞吞噬。由于此過程不發(fā)生溶酶體、線粒體及細(xì)
胞膜破裂，沒有細(xì)胞內(nèi)涵物外溢，故不引起炎癥反應(yīng)
和周圍組織次級損傷。
(三)細(xì)胞凋亡的基因調(diào)控
細(xì)胞凋亡是一系列基因的激活、表達(dá)、調(diào)控的結(jié)
果。調(diào)控基因主要通過死亡受體途徑(如fas／fasl
受體一配體系統(tǒng))介導(dǎo)，引起caspases激活導(dǎo)致細(xì)胞
凋亡，這是大多數(shù)細(xì)胞凋亡的形式。有研究發(fā)現(xiàn)，有
些促凋亡基因如bax即使在caspases失活的情況
下仍可介導(dǎo)線粒體損傷，使線粒體膜通透性增加，釋
放細(xì)胞色素c導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。這表明線粒體是介導(dǎo)
細(xì)胞凋亡另一途徑。另外。也可通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑發(fā)生
凋亡
[作者簡介]張海東(1969一)，男，漢族，山東人，醫(yī)學(xué)學(xué)士，副教授，副主任法醫(yī)師，研究方向：法醫(yī)病理學(xué)；
tel：+86—10—68633318。e—mail：zhd_ zzw@126．com
法律與醫(yī)學(xué)雜志2007年第14卷(第3期)
調(diào)控基因包括促進(jìn)細(xì)胞凋亡的基因和抑制細(xì)胞
凋亡的基因兩大類閣。凋亡促進(jìn)基因(apoptosis on)包
括野生型p53，ice，tgfb，fas，c—myc，ced一3，ced-
4。bax等。凋亡抑制基因(apoptosis of)包括bc1-2，rb．ced一9，突變型p53等。
二、細(xì)胞凋亡與中毒
(一)細(xì)胞凋亡的毒理學(xué)意義
細(xì)胞凋亡不僅是多細(xì)胞體的生命過程，也是機(jī)
體受外源物質(zhì)侵害時(shí)的一種病理性防御反應(yīng)。外源
化學(xué)物質(zhì)作用于機(jī)體，其毒性呈現(xiàn)一定的劑量一效應(yīng)
關(guān)系和時(shí)間一效應(yīng)關(guān)系，而這種s形曲線同樣出現(xiàn)在外源物質(zhì)誘導(dǎo)凋亡的過程中。在一定劑量范圍內(nèi)，外
源化學(xué)物質(zhì)作用于細(xì)胞并不直接殺死細(xì)胞，而只是
引起細(xì)胞損傷，使這些細(xì)胞獲得了激活內(nèi)在程序性
自殺機(jī)制的能力，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，且凋亡細(xì)胞數(shù)
與毒物的劑量和作用時(shí)間呈明顯s形關(guān)系曲線。而
當(dāng)毒物作用超過細(xì)胞負(fù)荷能力，它便會(huì)象機(jī)體發(fā)病
那樣表現(xiàn)出“病態(tài)”一壞死，從而引發(fā)一系列的繼發(fā)
損害。[6
1(二)細(xì)胞凋亡的毒理學(xué)研究
近年來。在一些中毒實(shí)驗(yàn)研究中已發(fā)現(xiàn)存在細(xì)
胞凋亡的現(xiàn)象。韋獻(xiàn)良等同研究發(fā)現(xiàn)海洛因成癮大
白鼠腦組織廣泛出現(xiàn)神經(jīng)元凋亡。并認(rèn)為這是海洛
因成癮致腦細(xì)胞神經(jīng)元死亡的主要形式。
saleh等
[81在低劑量對氧磷中毒鼠模型中發(fā)現(xiàn)
有典型細(xì)胞凋亡的特征。田英平等[9】在大鼠急性甲
胺磷中毒的模型研究中發(fā)現(xiàn)存在膈肌細(xì)胞凋亡，由
此，推測膈肌細(xì)胞凋亡可能是急性有機(jī)磷中毒、呼吸
肌麻痹發(fā)生和呼吸肌功能不全的原因之一。王英鵬
等㈣對有機(jī)磷中毒后的動(dòng)物遲發(fā)性神經(jīng)病變中細(xì)
胞凋亡的變化進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)在母雞三磷酸甲酯
中毒模型中出現(xiàn)腰髓前角神經(jīng)元細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。說
明通過凋亡引起神經(jīng)元功能損傷在有機(jī)磷中毒后遲
發(fā)性神經(jīng)病中起重要作用。曾明等[11】對樂果對小鼠
骨骼肌的細(xì)胞毒性和凋亡誘導(dǎo)效應(yīng)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)
樂果對離體骨骼肌細(xì)胞具有明顯的細(xì)胞毒性。并誘
導(dǎo)骨骼肌細(xì)胞的凋亡，可能在有機(jī)磷農(nóng)藥中毒中間
型綜合征(ims)的發(fā)病過程中發(fā)生作用。
井玲等[ 21報(bào)道，在氟化鈉中毒大鼠中，氟化鈉
致肝細(xì)胞凋亡，且在氟中毒肝臟病變中扮演重要角
色。呼亞偉等[ 31研究發(fā)現(xiàn)氟中毒可導(dǎo)致肝、腎細(xì)胞
凋亡，p53參與并介導(dǎo)細(xì)胞凋亡。邢德利等㈣研究認(rèn)
為，過量氟致大鼠腦細(xì)胞增殖能力下降和細(xì)胞凋亡
· 233 ·
增高。與氟神經(jīng)毒性作用機(jī)制有關(guān)。
piantadosi等舊在大鼠一氧化碳(co1中毒研究
中發(fā)現(xiàn)。co中毒后鼠大腦內(nèi)既有腦細(xì)胞壞死，又有
腦細(xì)胞凋亡的現(xiàn)象。劉菲等[ 61在其實(shí)驗(yàn)研究中得
出。co中毒致大鼠腦細(xì)胞凋亡，可能是co中毒致
腦損傷的病理機(jī)制之一。劉穎菊等舊研究發(fā)現(xiàn)急性
co中毒可引起小鼠大腦皮層、海馬、紋狀體等部位
腦細(xì)胞凋亡，凋亡細(xì)胞在3天后明顯增加，5～7天達(dá)
到高峰，14天后恢復(fù)正常，同時(shí)可誘導(dǎo)促凋亡基因
fas、fasl蛋白表達(dá)，表達(dá)高峰在中毒后3～2天，早
于凋亡發(fā)生的時(shí)間。認(rèn)為中毒所致遲發(fā)性腦病可能
與腦細(xì)胞凋亡有關(guān)。劉福佳等[18】通過觀察co中毒
后小鼠海馬細(xì)胞凋亡和凋亡相關(guān)因子bcl一
2、bax和
caspasa一3蛋白表達(dá)變化。進(jìn)一步探討了co中毒遲
發(fā)性腦病的發(fā)生機(jī)制。
朱萬琴等[ 91在大鼠醋氨酚中毒研究中報(bào)道。醋
氨酚所致肝細(xì)胞凋亡，隨中毒劑量增大，肝細(xì)胞凋亡
數(shù)增多。同時(shí)伴大量肝細(xì)胞壞死。認(rèn)為肝細(xì)胞凋亡過
度同樣是肝細(xì)胞損傷的一種方式，可能是肝細(xì)胞壞
死的主要機(jī)制。
dusinska m 等研究發(fā)現(xiàn)。百枯草中毒后大量
超氧陰離子自由基的產(chǎn)生導(dǎo)致強(qiáng)烈外源性氧化應(yīng)激
反應(yīng)。直接引起肺組織細(xì)胞dna的損傷而致細(xì)胞
凋亡明顯增加。另外，楊俊慧等[21】發(fā)現(xiàn)在卡那霉素
耳中毒后耳蝸毛細(xì)胞存在凋亡。在耳蝸損害中起重
要作用。
(三)細(xì)胞凋亡的法醫(yī)毒理病理學(xué)研究
程亦斌等[ 】通過建立小鼠毒鼠強(qiáng)中毒的實(shí)驗(yàn)?zāi)?/p>
型。通過常規(guī)h-e染色及凋亡細(xì)胞檢測技術(shù)對小鼠
毒鼠強(qiáng)急、慢性中毒后腦、心、肝、腎等器官的病理學(xué)
改變進(jìn)行系統(tǒng)研究分析，發(fā)現(xiàn)急性大劑量毒鼠強(qiáng)中
毒后，在組織細(xì)胞尚未來得及大量發(fā)生凋亡的前提
下，機(jī)體已因陣發(fā)性或持續(xù)性痙攣抽搐而死亡，但其
發(fā)生凋亡的細(xì)胞數(shù)仍較正常對照組為多，只尚未達(dá)
到高峰。慢性中毒組小鼠在中毒后的不同時(shí)間段內(nèi)，腦、心、肝、腎等器官凋亡細(xì)胞數(shù)均高于正常對照組
及急性中毒致死組，且同一器官的凋亡細(xì)胞數(shù)在不
同中毒時(shí)間段內(nèi)有所差異；不同器官的凋亡細(xì)胞數(shù)的峰值在不同中毒時(shí)間段內(nèi)亦有所不同。認(rèn)為慢性
毒鼠強(qiáng)中毒，在臨床癥狀不明顯及法醫(yī)毒物分析難
以檢測的情況下，應(yīng)用凋亡細(xì)胞檢測技術(shù)可成功檢
測出機(jī)體的主要器官的病理學(xué)改變，表明小劑量、慢
性中毒對機(jī)體仍有一定的影響。
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以后，雷懷成等 分別對烏頭堿中毒的心肌細(xì)
胞、肝細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞凋亡的觀察。發(fā)現(xiàn)大鼠
在中毒后的不同時(shí)間段，心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞和腎小管
上皮細(xì)胞凋亡數(shù)均高于正常對照組，且同一器官的凋亡細(xì)胞數(shù)在不同時(shí)間段差異有顯著性。提示在烏
頭堿中毒臨床癥狀不明顯及毒物分析難以檢測的情
況下．應(yīng)用凋亡細(xì)胞檢測技術(shù)可成功檢測出心肌細(xì)
胞、肝細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞的病理學(xué)變化。
三、結(jié)語
許多資料表明．外源性化學(xué)物質(zhì)可以誘導(dǎo)或抑
制細(xì)胞凋亡，凋亡又與細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等多種重
要的生物學(xué)科和醫(yī)學(xué)學(xué)科相關(guān)聯(lián)。我國法醫(yī)毒理學(xué)
具有鮮明的特色舊，有許多毒物的中毒機(jī)制等方面
仍需進(jìn)一步探討。上述法醫(yī)學(xué)研究結(jié)果為毒理學(xué)、法
醫(yī)毒理病理學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)提供了較為系統(tǒng)的資料，為今后其他類似毒物的法醫(yī)毒理病理學(xué)研究提供了
新方法和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
參考文獻(xiàn)
[1】程亦斌，劉寧國，張建華，等．毒鼠強(qiáng)中毒的凋亡細(xì)胞研究
[j】．法醫(yī)學(xué)雜志，2002，18(3)：137～1
43[2]雷懷成，易建華，劉濤．烏頭堿中毒肝細(xì)胞凋亡的觀察[j]．
衛(wèi)生毒理學(xué)雜志，2004，18(3)：199~200
[3】雷懷成，易建華．烏頭堿中毒腎小管上皮細(xì)胞凋亡的觀察
[j】．工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病，2005，31(2)：83～8
5[4】雷懷成，宋道江，易建華，等．大鼠烏頭堿中毒心肌細(xì)胞凋
亡的研究[j]．中國工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志，2004，17(6)：373～374
[5] ranganath rm，nagashree nr．role of programmed cell
death in development[j】．int rev cytol，2001，202：159—
2[6】楊瑞華。細(xì)胞凋亡及其毒理學(xué)意義[j]。衛(wèi)生毒理學(xué)雜志，1997，11(3)：196—197
[7】韋獻(xiàn)良，葉峻，周燕．海洛因成癮大白鼠腦內(nèi)神經(jīng)原凋亡的超微結(jié)構(gòu)觀察．廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，21(1)：31～33
[8】salth am，vijayasarathy c，femandez—cabezudo m，et a1．
influence of paraoxon(pox)and parathion(pat)on apoptosis：
a possible mechanism for toxicity in low-dose exposure
[j】．j appl toxieol，2003，23(1)：23~29
法律與醫(yī)學(xué)雜志2007年第14卷(第3期)
[9】田英平，蘇建玲，霍書花，等．急性甲胺磷中毒膈肌細(xì)胞凋
亡的研究[j]．中華內(nèi)科雜志，2004，43(11)：865~866
[10】王英鵬，朱俊峰，饒志仁，等．三磷酸甲酯中毒致母雞脊髓
神經(jīng)元凋亡的研究fj]．中華勞動(dòng)衛(wèi)生職業(yè)病雜志，2004，22(1)：19~2
1[11】曾明，路嘉宏，張才云，等．樂果對小鼠骨骼肌細(xì)胞毒性作
用及凋亡的誘導(dǎo)[j1．中國公共衛(wèi)生．2005，21(9)：1105~
1106
[12】井玲，石俊，任立群，等．氟中毒大鼠肝細(xì)胞凋亡研究[j]．
中華地方病學(xué)雜志，1999，18(2)：84～86
[13】呼亞偉，崔炳元，張津旗，等．氟中毒大鼠肝腎細(xì)胞凋亡與
p53的關(guān)系[j]．中國地方病防治雜志，2002，17(3)：141~
142
[14】邢德利，徐淑艷，張文嵐，等．過量攝氟對大鼠腦組織氧化
侵襲與細(xì)胞凋亡的影響[j]．中國地方病防治雜志，2006，21(1)：7~9
[15】piantadosis ca，zhang j，levin ed，et a1．a(chǎn)poptosis and
delayed neuronal damage after carbon monoxide poisoning
in the rat~]．exp neurol，1997，147(1)：103-114
[16】劉菲，劉郁．流式細(xì)胞儀檢測急性一氧化碳中毒后大鼠腦
細(xì)胞凋亡[j】．中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，29(6)：420~422
[17】劉穎菊，楊俊卿，周歧新，等．急性一氧化碳中毒致腦細(xì)胞
凋亡及相關(guān)基因表達(dá)[j]．工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)?。?000，26
(5)：257~260
[18】劉福佳，高春錦，夏成青，等．急性一氧化碳中毒小鼠腦海
馬細(xì)胞凋亡及bcl一
2、bax和caspasa一3蛋白表達(dá)[j]．中華
航海醫(yī)學(xué)與高氣壓醫(yī)學(xué)雜志．2005。12(2)：66～68
[19】朱萬琴，顧偉，董昕．醋氯酚中毒致肝細(xì)胞凋亡[j]．中華急
診醫(yī)學(xué)雜志，2003，12(6)：397～399
[20]dusinska m，kovacikova z，vallova b，et a1．responses of
alveolannacmphages and epithelial type ii cehs to oxidatire
dna damage causedby paraqaut[j]．carcinogenesis，1998．19：809～812
[21】楊俊慧，劉兆華．卡那霉素致豚鼠耳蝸細(xì)胞凋亡及cas．
pase-3表達(dá)的研究[j]．實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2005，21(13)：
1390～1392
[22]張益鵠．中國特色的法醫(yī)毒理學(xué)[j]．法醫(yī)學(xué)雜志，2004，20
(2)：101~104
(收稿：2006—11-14)
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